Thesis (Ph.D)-Cairo University, 2023.

Bibliography: pages 117-141.

Cryptosporidiosis remains a main source of life-threatening diarrhea in young children and immunocompromised patients. In addition, the current approved treatment; Nitazoxanide, only decreases the duration time of diarrhea in immunocompetent adults but is not effective in immunocompromised population. The present work was a trial to find the potential efficacy of Tavaborole (AN2690) as a promising drug against Cryptosporidium parvum, versus Nitazoxanide in an in vitro human ileocecal adenocarcinoma (HCT-8) culture model. Drug efficacy was evaluated from the molecular viewpoint through quantitative real time PCR, and the parasitological viewpoint through Transmission electron microscope (TEM) study. The molecular assessment revealed a statistically remarkable decrease in parasitic load under the effect of Tavaborole when contrasted to Nitazoxanide. TEM images were in correlation with molecular results, where apparent drug-induced distortion of the parasitic typical morphology under Tavaborole influence was detected. Furthermore, no Tavaborole induced toxic evidence was observed regarding hosting HCT-8 monolayers morphology. It can be concluded that Tavaborole can be a promising safe anti-Cryptosporidial agent in cultures.

صممت هذ ه الدراسة لتقييم التأثير العلاجي المحتمل لـعقار تافابورول AN2690)) كدواء مضاد لداء طفيل الكريبتوسبوريديم بارفم، وذلك مقارنه بنظيره الحالي (عقار نيتازوكسانيد). تم أجراء الدراسة داخل نموذج لخلايا سرطان اللفائفي البشري المضيفة (HCT-8). وقد تم تقييم نمو طفيل الكريبتوسبوريديم بارفم تحت تأثير عقار تافابورول من المنظور الجزيئي من خلال تطبيق تفاعل البلمرة المتسلسل الكمي. بالإضافة إلى ذلك، تم تطبيق دراسة المجهر الإلكتروني النافذ لفحص التأثير المحتمل لعقار تافابورول على البنية التحتية الدقيقة لطفيل الكريبتوسبوريديم بارفم من المنظور الطفيلي
تضمنت مجموعات الدراسة الاتي: المجموعة الضابطة السلبية (خلايا غير مصابة بعدوي الكريبتوسبوريديم بارفم وغير معالجة)، ومجموعة الخلايا غير المصابة بالعدوي والمعالجة بعقار تافابورول، والمجموعة الضابطة المصابة (خلايا مصابة بالعدوى وغير معالجة)، ومجموعة الخلايا المصابة بالعدوى ومعالجة بعقار تافابورول، والمجموعة الضابطة المعالجة (الخلايا المصابة بالعدوي ومعالجه بعقار نيتازوكسانيد).
أولا، تم تحضير نموذج خلايا سرطان اللفائفي البشري المضيفه عن طريق زراعة الخلايا في وسط DMEM المضاف إليه 10٪ من مصل العجل الجنيني المعطل بالحرارة، و100 وحدة / مل من البنسلين، و100 ميكروغرام / مل من الستربتومايسين في حاضنة 5٪ ثاني أكسيد الكربون في 37 درجة مئوية وتم تركها للنمو مع الفحص اليومي. بعد مرور 72 ساعة والتأكد من نمو وتكدس الخلايا بنسبه لا تقل عن 80%، تم نقل الخلايا الي أطباق بلاستيكية مكونة من 24 بئرًا لإجراء الدراسة بها.
تم تطبيق اختبار السمية الخلوية لـعقار تافابورول على نموذج خلايا سرطان ال اللفائفي البشري المضيفه (HCT-8) عن طريق مقايسة الفحص اللوني 3 - (4،5-ديميثيلميدازول - 2 -yl) 2،5 ثنائي فينيل رباعي بروميد (MTT). وفقًا لنتائج مقايسة MTT، تم وحساب وتقدير نصف قيمة التركيز المثبط القصوى (IC50) لعقار تافابورول وهي 2.56 ميكرومولار.
لتطبيق عدوي خلايا سرطان اللفائفي البشري المضيفه بطفيل الكريبتوسبوريديم بارفم، تم إصابة الطبقات الأحادية لخلايا سرطان القولون البشري المتكدسه بعدد 4x105 من كيسات كريبتوسبوريديم بارفم القابلة للنمو والسابق تعقيمها، وتم تحضينها لمدة 3 ساعات لتحفيز استثاره الكيسات وخروج طور أبواخ الكريبتوسبوريديم لعدوي الخلايا.
تم اختيار تركيز جرعه عقار تافابورول المطبقة في هذه الدراسة لتكون 1 ميكرومولار، وذلك بناءً على نتيجة اختبار السمية الخلوية والحساب اللاحق لنصف قيمة التركيز المثبط القصوى IC50)) للعقار. بالنسبة لعقار نيتازوكسانيد، تم تطبيق جرعة تركيز 8 مجم / لتر.

Issues also as CD.

Text in English and abstract in Arabic & English.