Doaa Rafaat Zaki Zahran,  <br/><br/>
Production of Diagnostic Antibodies against Bacterial Food Toxins using Phage Display Technique   
 انتاج الاجسام المضاده التشخيصيه ضد السموم الغذائيه  البكتيريه باستخدام تقنيه الاظهار بالفاج /  
by Doaa Rafaat Zaki Zahran ; Supervisor Prof. Dr. Mahasen Hassan Ismail, Prof. Dr. Mary Sobhy Khalil, Prof. Dr. Reda EL-Sayed Salem 
 - 105 pages :   illustrations ;   25 cm. +   CD. 
<br/><br/>Thesis (Ph.D)-Cairo University, 2023. 
<br/><br/>Bibliography: pages 91-105.  
<br/><br/> Pseudomonas aeruginosa is Gram-negative opportunistic pathogen that causes<br/>chronic and acute infections at different sites within body mostly in hospitalized<br/>patients such as urinary tract infections, respiratory system infections, dermatitis,<br/>soft tissue infections and bacteremia.Exotoxin A inhibits protein synthesis in<br/>infected cells by ADP-ribosylation of eukaryotic elongation factor 2. ExotoxinA<br/>one of the most virulent factors of Pseudomonas aeruginosa which was<br/>concentrated and purified. Purification of toxin A produced by only two steps<br/>ion exchange chromatography and gel filtration chromatography which yield<br/>highly purified toxin. The molecular weight of exotoxin A is 66 KDa. ELISA is<br/>used for diagnosis of exotoxin A which act as more rapid, sensitive and simple<br/>methods. SDS, indirect ELISA and Western blotting test performed to confirm<br/>extraction of toxin A. Special primers designed to detect presence of tox A<br/>virulence factor, 70.5% of isolated samples have the toxA gene  إنتاج الأجسام المضادة التشخيصية ضد السموم الغذائية البكتيرية باستخدام تقنية  الاظهار بالفاج <br/>Pseudomonas aeruginosa هو السبب الأكثر شيوعًا لعدوى المستشفيات ، خاصةً في المرضى الذين يعانون من ضعف في جهاز المناعة. P. aeruginosa هو مُمْرِض انتهازي سالب الجرام ويسبب التهابات مزمنة وحادة في مواقع مختلفة داخل الجسم ، ومعظمها في المستشفيات مثل التهابات المسالك البولية والتهابات الجهاز التنفسي والتهاب الجلد والتهابات الأنسجة الرخوة وتجرثم الدم. يثبط السموم الخارجية A الناتجة من P. aeruginosa تخليق البروتين في الخلايا المصابة عن طريق ADP-ribosylation لعامل استطالة حقيقيات النوى 2. تنقية السموم A الناتجة عن كروماتوغرافيا التبادل الأيوني على مرحلتين وكروماتوجرافيا الترشيح الهلامي والتي تنتج سمًا عالي النقاء. الوزن الجزيئي للسموم الخارجية أ هو 66 KDa. يتم استخدام ELISA لتشخيص السموم الخارجية التي تعمل كطرق أكثر سرعة وحساسية وبسيطة. تم إجراء اختبار SDS و ELISA غير المباشر واختبار النشاف الغربي لتأكيد استخراج السم أ. مواد أولية خاصة مصممة لاكتشاف وجود عامل الضراوة السامة ، 70.5٪ من العينات المعزولة تحتوي على الجين السام أ. يعد استخدام الأجسام المضادة المعادلة لاستهداف عوامل الفوعة نهجًا فريدًا لعلاج عدوى Pseudomonas المقاومة للمضادات الحيوية. السموم الخارجية A هي واحدة من أكثر عوامل الفوعة فاعلية في P. aeruginosa في هذا الصدد. كان الهدف من هذا التحقيق هو العثور على جسم مضاد جديد لـ scFv بشري ضد P. aeruginosa exotoxin A باستخدام مكتبة scFv بشرية. يتم التعبير عن Exotoxin A في E. coli لإنتاج بروتين تم حقنه بعد ذلك في الفئران. تسلسل ترميز المجالات المتغيرة IgG ، والتي تم تجميعها في scFv. تم عزلهم من الحمض النووي الريبي في الطحال. مع وحدات تشكيل لوحة 1 × 105 ، تم إنشاء مكتبة ثلاثية العاثيات بما في ذلك متغير جزء سلسلة واحدة (scFv). كشفت خصائص المكتبة عن انتقائية عالية وتقارب scFvs تم إنتاجها وإنتاجها كبروتينات بكتيرية بوزن جزيئي قدره 31.67 كيلو دالتون.<br/> 
<br/><br/>
<br/><br/><br/>Text in English and abstract in Arabic & English. 
<br/><br/><label>Subjects--Topical Terms: </label><br/>Food toxins
<br/><br/><label>Subjects--Index Terms: </label>ELISA  Pseudomonas aeruginosa  SDS  Toxin A and Tox A 
<br/><br/><label>Dewey Class. No.: </label>615.954