The effect of follicular aspiration on ovarian and uterine dynamics and hemodynamics in mares/
/ تأثير شفط السائل الجريبي علي ديناميكية و تدفق الدم عبر أنسجة المبيض والرحم في الأفراس
by Abd-Allah Essam Abd-Aallah El-gharieb ; supervision of Dr. Yehia El Baghdady , Dr. Khaled Hafez El-Shahat , Dr. Amal M. Aboelmaaty
- 131pages : illustrations ; 25 cm. + CD.
Thesis (M.Sc.)-Cairo University, 2023.
Bibliography: pages 112-131.
Transvaginal aspiration of equine oocytes (TVA) is one of the well-developed assisted reproduction technologies (ART) in the equine industry which is commonly used to collect oocytes for in vitro production of embryo (IVP). This work aimed to determine the effect of transvaginal ultrasound-guided follicle aspiration in mares on ovarian folliculogenesis by monitoring ovarian follicular and luteal hemodynamics using Doppler ultrasonography associated with circulating estradiol (E2), progesterone (P4), horse insulin, and insulin-like growth factor-I (IGF-1). In addition, nitric oxide (NO), total proteins, albumin, glucose, cholesterol, catalase, glutathione reduce and lactate dehydrogenase (LDH) before and after transvaginal follicle aspiration were determined. Five pluriparous aged mares 15-18 years old were scanned using the ultrasound-Doppler scanner to determine ovarian follicles, corpus luteum, and uterine dynamics and hemodynamics for three complete successive estrous cycles before follicles aspiration where Day 0 was the day of ovulation and for 12 to15 days after first and second dominant follicle aspiration where Day 0 was the day of aspiration. Blood samples were collected for hormonal assay. The effect of the day of the estrous cycle before or after follicle aspiration on the studied parameters was statistically analyzed. Results showed that follicle diameter, antral diameter, follicle area, antral area, and granulosa area linearly declined (P<0.0001) from the dominant, subordinate1, to reach the lowest one for the subordinate 2, The dominant follicle granulosa area showed a significant increase in the Day 1(P<0.0001), Day 5 (P<0.05) and Day 10 compared to the subordinate follicle. Days of the estrous cycle influenced the uterine horn color area (P<0.05), the uterine horn color area % (P<0.05), CL color area (P<0.05), CL color area % (P=0.05), E2 (P<0.0001), and NO levels (P<0.0001). CL area decreased (P<0.05) and blood flow area insignificantly declined after follicle aspiration compared to that developed after spontaneous ovulation till Days 12 and for the first four days and Day 15. After spontaneous ovulation, uterine horns’ diameters increased but the uterine horns color area % decreased on Day 2 and Day 9 and throughout the days from Day 2 to Day 12. No significant difference was existed between the cholesterol concentration after spontaneous ovulation or dominant follicle aspiration. In conclusion, the aspiration of the large follicle simulates ovulation in mares as indicated by the luteinization of the partially aspirated follicle with its development to the corpus luteum. Also, the uterine horn diameter, area and blood flow hemodynamics did not vary after the dominant follicle aspiration. The progesterone concentrations increased after dominant follicle aspiration and for 12 days as compared to the normal CL developed after spontaneous ovulation. يعتبر الشفط عبر المهبل لبويضات الخيول (TVA) أحد تقنيات التكاثر المساعدة المتطورة (ART) في صناعة الخيول والتي تستخدم بشكل شائع لجمع البويضات لإنتاج أجنة الخيول في المختبر (IVP). هدفت هذه الدراسة إلى تحديد تأثير شفط الجريب عبر المهبل على تكوّن الجريبات في المبيض ، ورصد ديناميكا الدم لجريب المبيض والجسم الأصفر باستخدام الموجات فوق الصوتية دوبلر ، وقياس أي تغيرات في كمية هرمونات الستيرويد (الإستروجين والبروجسترون) بالإضافة إلى عامل نمو الأنسولين في الحصان 1 (H-IGF1) وتسجيل تباين بعض الإجهاد التأكسدي قبل وبعد شفط الجريبات عبر المهبل. تم فحص خمسة أفراس بعمر أكبر من 18 عامًا باستخدام ماسح ضوئي دوبلر بالموجات فوق الصوتية لتحديد ديناميكيات بصيلات المبيض وديناميكا الدم قبل شفط الجريبات, وتمت دراسة ديناميكيات جريبات المبيض وديناميكا الدم لثلاث دورات شبق كاملة قبل شفط الجريبات حيث يكون اليوم 0 هو يوم الإباضة ولمدة 12 إلى 15 يومًا بعد شفط الجريبات السائدة الأول والثاني حيث يكون اليوم 0 هو يوم الشفط. تم جمع عينات الدم للمقايسة الهرمونية. تم استخدام مصل الدم لتحديد تركيزات الاستراديول (E2) والبروجسترون (P4) باستخدام مجموعات ELISA التجارية ، بالإضافة إلى مستقلبات أكسيد النيتريك (NOMs) ، والبروتينات الكلية ، والألبومين ، والجلوكوز ، والكوليسترول ، والكتلاز ، والجلوتاثيون. تم فحص نازعة هيدروجين اللاكتات (LDH) باستخدام مجموعات تجارية اختبار حركية إنزيمية محددة ، في حين تم تقييم الأنسولين مثل عامل النمو I (IGF-1) في البلازما المجمعة باستخدام مجموعات ELISA التجارية. تم تقييم قطر قرني الرحم وقطر الجسم الأصفر ومساحتهما ومنطقة اللون ومنطقة اللون٪. بالإضافة إلى قطر الجريب ومنطقة الجريب ومنطقة لون الجريب ومنطقة لون الجريب٪. تم إجراء تحليل إحصائي لدراسة تأثير يوم الدورة الشبق قبل أو بعد شفط الجريبات حيث أن اليوم 0 هو يوم الإباضة في دورات بدون شفط ويوم الشفط (اليوم 0) في دورات مع الشفط على الدلالات المدروسة. أظهرت النتائج أن قطر الجريب ، قطر الغار ، المنطقة ، المنطقة الغارية ، والمنطقة الحبيبية انخفض خطيًا (P <0.0001) من السائد ، التابع 1 ، ليصل إلى أدنى نقطة للتابع 2 ، أظهرت المنطقة الحبيبية السائدة زيادة معنوية في اليوم الأول (P <0.0001) واليوم الخامس (P> 0.05) واليوم 10 مقارنة بالجريب الثانوي ، أثرت أيام الدورة الشبقية على منطقة لون قرن الرحم (P <0.05) منطقة لون قرن الرحم٪ (P <0.05) ، منطقة لون CL (P <0.05) ، مساحة لون CL٪ (P = 0.05) ، تركيزات استراديول (E2 ؛ P <0.0001) ، ومستويات أكسيد النيتريك (P < 0.0001) ، تكون مساحة الجسم الأصفر بعد شفط البصيلات أقل (P <0.05) والتي تطورت بعد الإباضة التلقائية حتى اليوم 12 ، ومنطقة تدفق الدم للجسم الأصفر بعد الشفط أقل بشكل ملحوظ مما هي عليه بعد الإباضة في الأيام الأربعة الأولى واليوم الخامس عشر ، زاد قطر قرن الرحم بعد الإباضة التلقائية في اليوم الثاني واليوم التاسع مقارنة بنفس الأيام التي تلي شفط البصيلات السائد ، كانت منطقة لون قرون الرحم ٪ بعد الإباضة أعلى منها بعد شفط البصيلات السائد على مدار الأيام من اليوم الثاني إلى اليوم الثاني عشر ، لم يلاحظ أي فرق معنوي في تركيز الكوليسترول بعد التبويض التلقائي أو شفط الجريب السائد. في الختام ، فإن شفط الجريب الكبير يحاكي الإباضة في الأفراس ، كما يتضح من عملية الشفط الجزئي للجريب وتطوره إلى الجسم الأصفر. وكذلك لم يتغير قطر قرن الرحم ومساحته وديناميكا الدم لتدفق الدم بعد شفط الجريب السائد. زادت تركيزات البروجسترون بعد شفط الجريب السائد ولمدة 12 يومًا مقارنة بالـ CL الطبيعي الذي نشأ بعد الإباضة التلقائية.