Evaluation of amniotic membrane homogenate and bee venom antimicrobial activity /
تقييم النشاط المضاد للميكروبات لمتجانس الغشاء الأمنيوتي و سم النحل /
By Nouran Ali Ahmed El Sagheer; Under the supervision of Prof. Dr. Mahmoud Dardiri El-Hariri, Prof. Dr. Mohamed Said Mostafa Amer.
- 139 pages : illustrations ; 25 cm. + CD.
Thesis (M.Sc.)-Cairo University, 2024.
Bibliography: pages 110-135.
Finding natural antimicrobial alternatives has been a must due to the continuous emergence of microbial strains that gain resistance to the common antibiotics. Amniotic membrane (AM) and bee venom (BV) are natural products that contain antimicrobial peptides (AMPs) as major components of their structure. Evaluation of antimicrobial activity of Bovine AM Homogenate (BAMH) and BV separately against standard strains of important pathogenic microorganisms was performed, BAMH antimicrobial activity was examined against: Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli and Salmonella Typhimurium using agar well diffusion test, no antimicrobial activity was detected, while BV antimicrobial activity was evaluated against; S. aureus, M. luteus, Bacillus subtilis as Gram’s positive (G +ve) microorganisms, P. aeruginosa, E. coli, S. Typhimurium as Gram’s negative (G –ve) bacteria and Candida albicans as a fungal microorganism by different in vitro methods as broth microdilution method to determine the minimum inhibitory concentrations (MIC), minimum bactericidal and fungicidal concentrations determination (MBC/MFC) and agar gel diffusion test with different conc.. BV showed a great antimicrobial activity against all the tested strains acting as a broad spectrum antimicrobial, G+ve strains required less conc. than G-ve strains, the least MIC and MBC values were those of S. aureus with values; 7.8 and 15.6 µg/ml respectively, while the highest MIC was 250 µg/ml for P. aeruginosa and the highest MBC was 1000 µg/ml for Salmonella Typhimurium, the MIC and MBC of C. albicans were the same; 15.6 µg/ml. Results of agar gel diffusion method revealed larger zones of inhibition with higher conc., the largest was 13 mm at conc. 1000 µg/ml against E. coli. Effect of bee venom on cells of S. aureus and S. Typhimurium was examined by transmission electron microscope (TEM) to observe the different cellular alterations against G +ve and G –ve bacteria. S. aureus exhibited detachment from the cell wall, translucent cytoplasm, shrunken cells with complete deformation, while S. Typhimurium suffered cell wall rupture and reduced electron density. لقد أصبح ٳيجاد بدائل طبيعية للمُضادات الحيوية ضرورة حتمية نتيجة للتزايُد المُستمر في ظهور سُلالات ميكروبية مُقاومة للمُضادات الحيوية الشائعة. و من المُنتجات الطبيعية التي لها تأثير مُضاد للميكروبات؛ الغشاء الأمنيوتي و سُم النحل و اللذان يحتويان على الببتيدات المُضادة للميكروبات كمكونات أساسية في تركيباتهم الطبيعية. و قد تم تقييم النشاط المُضاد للميكروبات للغشاء الأمنيوتي للأبقار في هيئة المُتجانس (BAMH) و سُم النحل على حدة ضد عدد من السُلالات القياسية البكتيرية الهامة. تم تقييم النشاط المُضاد للميكروبات ل BAMH ضد :Staphylococcus aureus ،Micrococcus luteus ،Salmonella Typhimurium ، Escherichia coli و Pseudomonas aeruginos باستخدام agar well diffusion test لكن دون ظهور أية مناطق تثبيط ضد أي من السُلالات المختبرة مما يدُل على عدم وجود نشاط مضاد للميكروبات لمتجانس الغشاء الامنيوتي للأبقار، بينما تم اختبار النشاط المُضاد للميكروبات لسُم النحل ضد السُلالات القياسية للبكتيريا ٳيجابية الجرام: S. aureus، M. luteus و Bacillus subtilis و سلبية الجرام و هي P. aeruginosa، E. coli و Salmonella Typhimurium بجانب Candida albicans كميكروب فطري باستخدام broth microdilution method لتحديد التركيزات الدُنيا المُثبطة للنمو(MIC) و تحديد التركيزات الدُنيا المُبيدة للبكتيريا و الفطريات (MBC/MFC) و عملagar gel diffusion test و قد أظهر سُم النحل نشاطاً مُضاداً لجميع السُلالات المُختبرة، و قد تطلبت البكتيريا ٳيجابية الجرام تركيزات أقل من البكتيريا سلبية الجرام و كانت أقل التركيزات لل S. aureus بقيم ٧،٨ و ١٥،٦ µg/ml لل MIC و MBC على التوالي، بينما أعلىMIC كان ذلك الخاص ب P. aeruginosa و قد بلغ ٢٥٠ µg/ml و أعلى MBC لل Salmonella Typhimurium و قد بلغ ١٠٠٠ µg/ml بينما تساوى ال MIC وال MBC الخاصين ب C. albicans و قد بلغا ١٥،٦ µg/ml. أظهر اختبار agar gel diffusion قياسات متعددة من مناطق التثبُط inhibition zones باختلاف التركيزات المُستخدمة و قد تراوحت بين صفر و ١٣ مم. نتيجة للتفاوت بين التركيزات الخاصة بالبكتيريا ٳيجابية و سلبية الجرام؛ تم فحص خلايا S. aureus و S. Typhimurium الطبيعية و المُعالجة بسُم النحل باستخدام الميكروسكوب الٳلكتروني النافذ (TEM) لملاحظة التغييرات الطارئة على الخلايا البكتيرية المُتأثرة بسُم النحل و قد أظهرت تشوهات في الخلايا و السيتوبلازم والأغشية الخلوية مع الاختلاف بين البكتيريا ٳيجابية و سلبية الجرام.