Thesis (M.Sc.)-Cairo University, 2024.

Bibliography: pages 107-143.

Equine influenza (EI) is a contagious respiratory illness affecting the Equidae family. It is caused by two viruses, H7N7 and H3N8; however, H7N7 has not been detected for decades. H3N8 split into Eurasian and American lineages. The latter is divided into Kentucky, South America, and Florida sub-lineages. Currently, only Florida clade 1 (FC1) and Florida clade 2 (FC2) strains are circulating. Vaccination is a fundamental measure for preventing and controlling EI, hence, various vaccines were developed using diverse technologies. Unfortunately, the majority of the commercially-available vaccines do not include FC2 strains despite being recommended by the World Organization for Animal Health (WOAH). Consequently, an immunological gap between the vaccines and the circulating strains left the Equine population vulnerable to clinical or sub-clinical infections. To overcome the probable disadvantages of classical vaccines, this research aimed to develop a novel EI vaccine through the expression of the FC2 HA antigen using baculovirus expression system. A consensus sequence of the HA gene was created from the A/equine/Richmond/1/2007 reference strain and three partial HA1 fragments of Egyptian FC2 strains and incorporated into a pFastBacHT™-A transfer vector. The gene was then transferred to a bacmid which was utilized for Sf9 insect cells’ transfection. The study successfully expressed the recombinant HA antigen, and hemadsorption test confirmed its biological activity. Furthermore, using specific anti-HA3-FC2 serum, the immunogenicity of the recombinant HA was confirmed by employing immunoperoxidase and western immunoblotting assays. This achievement lays the groundwork for developing a novel subunit EI vaccines against H3N8 FC2 strains.

الإنفلونزا الخيلية (EI) هي مرض تنفسي معدي يصيب عائلة الخيول. يسببه فيروسان، H7N7 و H3N8، ولم يتم اكتشاف H7N7 منذ عدة عقود. انقسم H3N8 إلى فروع أوراسية وأمريكية، وانقسم الفرع أمريكي إلى مجموعات فرعية في كنتاكي وأمريكا الجنوبية وفلوريدا. حاليًا، تدور فقط سلالات فلوريدا الفرعية 1 (FC1) وفلوريدا الفرعية 2 (FC2). يعد التلقيح أحد الوسائل الأساسية لمنع والحد من انتشار EI، ولهذا تم تطوير مجموعة متنوعة من اللقاحات باستخدام تقنيات مختلفة. لكن لسوء الحظ، فمعظم اللقاحات المتاحة تجاريًا لا يتضمن سلالات FC2 على الرغم من التوصيات منظمة الصحة الحيوانية العالمية (WOAH). تبعًا لذلك، فإن الفجوة المناعية الموجودة بين اللقاحات والسلالات المنتشرة جعلت الفصيلة الخيلية عرضة للعدوى السريرية أو تحت السريرية. وللتغلب على المثالب المحتملة للقاحات الكلاسيكية، هدفت هذه الدراسة إلى إنشاء لقاح جديد لإنفلونزا الخيول عن طريق التعبير عن البروتين المناعي HA من سلالة FC2 في نظام تعبير baculovirus. تم إنشاء تتابع جيني مجمّع من السلالة المرجعية A/equine/Richmond/1/2007 وأجزاء من جين HA1 لثلاث معزولات مصرية، وتم إدماجه في الناقل pFastBacHT™-A. تم نقل الجين بعد ذلك إلى bacmid والذي تم استخدامه لعدوى خلايا Sf9 الحشرية. نجحت الدراسة في التعبير عن الجين المدمج HA وقد أكدت الاختبارات فاعلية البروتين HA الحيوية من خلال اختبارات hemadsorption and hemagglutination. إضافة إلى ذلك، وباستخدام مصل خاص ضد HA3 FC2 تم التأكد من الخصائص المناعية المحددة من خلال اختبارات immunoperoxidase and western immunoblotting. يعد هذه الإنجاز أساسًا لتطوير لقاحات حديثة مدمجة أو جزيئية ضد إنفلونزا الخيول من سلالات FC2

Issues also as CD.

Text in English and abstract in Arabic & English.