Thesis (M.Sc.)-Cairo University, 2023.

Bibliography: pages 114-122.

Purification of Biopharmaceuticals is crucial to ensure their best quality, safety and
efficacy, in this study, both process and product related impurities have been
discussed.
Regarding Endotoxin which is a major process-related impurity, a developed
method for biologics purification from acquired endotoxin contamination is
introduced. This is accomplished by the preparation of dextran-coated magnetic
nanoparticles using a facile rapid co-precipitation method.
The resulting magnetic nanoparticles (MNPs) are characterized by dynamic light
scattering, transmission electron microscope, Fourier transform infrared
spectroscopy, X-ray diffraction, and vibrating sample magnetometry.
The dextran-coated magnetic nanoparticles are further coupled to either polymyxin
B or histidine to provide a positively charged ligand which enhances the affinity to
the negatively charged endotoxin. Both ligands-coupled MNPs are tested for
purification efficiency using the chromogenic kinetic assay. The method conditions
are optimized using a two-level factorial design to achieve best purification
conditions of the contaminated biologics and indicated endotoxin removal
percentage 85.12% and maximum adsorption capacity of 38.5 mg/g, for histidine-
coupled MNPs, while endotoxin removal percentage 65.85% and maximum
adsorption capacity of 35.7 mg/g, for PMB-coupled MNPs.
This developed method is introduced to serve biologics manufacturers to improve
their manufacturing processes through providing a simple purifying tool for
biologics from acquired endotoxin contamination.
Regarding product related impurities, this study discussed the effect of different
stress factors such as UV-radiation, oxidation, pH, mechanical agitation, freezing
and thawing on the impurity profile of Filgrastim innovator and its biosimilars
using RP-HPLC, SE-HPLC and SDS-PAGE

تتكون الرسالة من ثلاثة اجزاء رئيسية(الجزء الأول) مقدمة عامة ومراجعة علمية عن مختلف طرق تحليل المستحضرات الحيوية، (الجزء الثاني) تحضير وتوصيف الجسيمات النانوية المغناطيسية المقترنة ب البوليميكسينB و الهيستيدين لتنقية المستحضرات الحيوية من التلوث بالسموم الداخلية المكتسبة، (الجزء الثالث) التقييم المقارن للشوائب المتعلقة بالمنتج في مستحضر الفلجراستيم ومثائله الحيوية .
الجزء الأول: مقدمة عامة والمراجعة العلمية
يتضمن هذا الجزء مقدمة عامة عن المستحضرات الحيوية وأنواعها المختلفة.
تم تقديم خلفية مختصرة حول كل من الشوائب المتعلقة بالعملية والمنتج إلى جانب النبذة وراء السم الداخلي و الفلجراستيم.
كما تم تقديم مقدمة مختصرة حول الجسيمات النانوية المغناطيسية مع جوانب مختلفة من تطبيقاتها.
كما تضمن مراجعة موجزة لطرق التحليل المختلفة الواردة في المراجع العلمية لإعداد الجسيمات النانوية المغناطيسية ، وإزالة السموم الداخلية وتقييم الفلجراستيم ومثائله الحيوية باستخدام طرق الفحص المختلفة.
الجزء الثاني: تحضير وتوصيف الجسيمات النانوية المغناطيسية المقترنة ب البوليميكسينB و الهيستيدين لتنقية المستحضرات الحيوية من التلوث بالسموم الداخلية المكتسبة
يتضمن هذا الجزء طريقة مطورة لإعداد الجسيمات النانوية المغناطيسية المغلفة بالديكستران مع منهجيات مختلفة للتوصيف بما في ذلك تشتت الضوء الديناميكي ، ومجهر الإرسال الإلكتروني ، والتحليل الطيفي للأشعة تحت الحمراء ، وانحراف الأشعة السينية ، وقياس مغناطيسية العينة.
تم اختبار وتحسين امتزاز السموم الداخلية باستخدام المركب المطور مسبقًا باستخدام تصميم عاملي.
تمت دراسة حركيات الامتزاز من خلال 4 نماذج مختلفة من الدراسات الحركية ودراسة متساوي الامتزاز كذلك.
الجزء الثالث: التقييم المقارن للشوائب المتعلقة بالمنتج في مستحضر الفلجراستيم ومثائله الحيوية
يتضمن هذا الجزء طرقًا مختلفة لتحديد وتعيين الفلجراستيم ومثائله الحيوية مثل كروماتوجرافيا السائل ذو الكفاءة العالية في الحالة المعكوسة و كروماتوجرافيا السائل ذو الكفاءة العالية لاستبعاد الحجم و الرحلان الكهربائي.
تم تطبيق عوامل إجهاد مختلفة مثل الأشعة فوق البنفسجية ، والأكسدة ، ودرجة الحموضة ، والتحريض الميكانيكي ، والتجميد والذوبان على تركيبات فيلجراستيم المختلفة وتم التحقق من التغيير في ملف شوائبها.

Issued also as CD

Text in English and abstract in Arabic & English.