Thesis (M.Sc.) -Cairo University, 2023.

Bibliography: pages 102-117.

Acute myeloid leukemia is an aggressive hematopoietic
malignancy of the myeloid lineage of hematopoietic cells that causes
excessive proliferation of partially differentiated or undifferentiated blasts
that supersedes the production of normal blood cells causing infection,
anemia, bleeding, and eventually death within months in untreated
patients.
AML is the most common form of acute leukemia in adults. It is
more common in males than females, with a median age of onset of 68
years.
Genetic and molecular alterations are common in AML
pathogenesis. These occur in hematopoietic stem or progenitor cells,
transforming them into leukemic stem cells (LSCs), and include
cytogenetic aberrations, copy-number variations, small insertions/
deletions, point mutations, and epigeneticand transcriptional changes.
Theses aberrations may act as drivers of leucemogenesis and serve as
prognostic markers or targets for therapy.
Calcitonin receptor-like (CALCRL) is a gene located on
chromosome 2q32.1. It mediates the pleiotropic effects of calcitonin
gene-related peptide (CGRP) and adrenomedullin (ADM) with
involvement in various key biological processes, including cell
proliferation, modulation of apoptosis, vascular biology, and
inflammation.
CALCRL is highly expressed in different forms of solid tumors,
including thyroid carcinomas, parathyroid adenomas, small-cell lung

۱۰۰
Summary
cancers, large-cell neuroendocrine carcinomas of the lung, pancreatic
neuroendocrine neoplasms, renal clear cell carcinomas, pheochromocytomas, lymphomas, and melanomas.A recent study showed that
CALCRL protein level was positively associated with the clonogenic
capacity of primary AML samples which implied a critical role of
CALCRL in AML cell proliferation.
CALCRL is considered a poor prognostic marker in AML as it is
associated with stemness, relapse, and poor outcome of AML. Increased
CALCRL gene expression was found to be associated with decreased
complete remission rate, increased incidence of relapse, lower overall
survival, and event-free survival. This makes CALCRL a potential
therapeutic target in AML.
In this study, we aimed to study the expression level of CALCRL
in denovo AML cases, verify its potential role as a poor prognostic
marker in AML, and study the possible association between CALCRL
gene expression and clinical data, laboratory findings, other prognostic
parameters and response to treatment.
Our study included 80 adult newly diagnosed acute myeloid
leukemia patients. The study included 18 females and 62 males; theirages
ranged from 18 years to 72 years, with a median age of 43.5 years.
CALCRL gene expression was measured by real-time PCR.A difference
in CALCRL expression was found between cases and controls as the
gene expression was higher in cases than in controls but didn’t reach a
statistical significance level.
Furthermore, investigating the possible association between
CALCRL gene expression andclinicopathological features as well as
treatment response and survival, it was found that there was no

۱۰۱
Summary
association between CALCRL expression and the previous data except
for the association between CALCRL expression and MPO, FAB
classification and relapse as the number of MPO positive cases was
higher in low CALCRL gene expression group and high CALCRL
expression was found in AML M2 while low CALCRL expression was
found in AML M4.
These findings point towards a role of CALCRL in HSCS and
LSCS and suggest that high CALCRL expression indicates an AML
phenotype at a more undifferentiated stage. Incidence of relapse was
higher with low CALCRL gene expression. Studying the combined effect
of CALCRL expression and patients' age on overall survival and relapse
free survival revealed that overall survival was significantly higher in low
CALCRL expression with age < 43.5 years.

سرطان الدم الميلودي الحاد هو ورم خبيث ينشأ من خلايا الدم الميلودية الأولية مسببا انتشارًا مفرطًا لخلايا متمايزة جزئيًا أو غير متمايزة تحل محل إنتاج خلايا الدم الطبيعية مسببة العدوى وفقر الدم والنزيف والموت في غضون أشهر في المرضى لو تم تركها دون علاج.
يعد سرطان الدم الميلودي الحاد الأكثر شيوعًا من أنواع سرطان الدم الحاد عند البالغين، وهو أكثر شيوعًا عند الذكور منه لدى الإناث بمتوسط عمر يبدأ من 68 عامًا.
سرطان الدم الميلودي الحاد ينتج عن التغيرات الجينية والجزيئية التي تحدث في خلايا الدم الجذعية أو الخلايا الاولية، وتحولها إلى خلايا جذعية ذات صيغة سرطانية ، وتشمل تلك التغيرات الانحرافات، وتغيرات معدل النسخ ، والإدخال / الحذف الصغير ، والطفرات النقطية ، والتغييرات اللاجينية والنسخية. قد تعمل هذه الانحرافات كدوافع لتكون سرطانات الدم وتعمل كعلامات تنبؤية أو أهداف للعلاج.
الجين الشبيه بستقبلات الكالسيتونين (CALCRL)، الموجود على الكروموسومq32.12، يحمل شفرة المستقبل المقترن ببروتين ج المكون من سبعة اجزاء ناشئة عبر غشاء الخلية و يتوسط التأثيرات متعددة الاتجاهات للببتيد المرتبط بجين الكالسيتونين (CGRP) والأدرينوميدولين (ADM).الجين الشبيه بمستقبلات الكالسيتونين (CALCRL) يشارك في مجموعة متنوعة من العمليات البيولوجية الرئيسية، بما في ذلك تكاثر الخلايا وتعديل موت الخلايا المبرمج وبيولوجيا الأوعية الدموية والالتهابات.
يتم التعبير عن CALCRL بشكل كبير في أشكال مختلفة من الأورام الصلبة بما في ذلك سرطان الغدة الدرقية، والأورام فى الغدة الجار الدرقية، و سرطان الرئة صغير الخلايا، وسرطان الغدد الصماء العصبية للخلايا الكبيرة في الرئة، و أورام الغدد الصماء العصبية في البنكرياس، وسرطان الخلايا الكلوية، و ورم القواتم، والأورام اللمفاوية، والأورام الميلانينية. أظهرت دراسة حديثة أن مستوى بروتين CALCRL كان مرتبطًا بشكل إيجابي بالقدرة الاستنساخية لعينات سرطان الدم الميلودي الحاد الأولية مما يدل على دور حاسم لـ CALCRL في تكاثر خلايا سرطان الدم الميلودي الحاد.
يعتبر CALCRL علامة تنبؤية سيئة في سرطان الدم الميلودي الحاد نظرًا لارتباطه بالجذعية والانتكاس والنتائج السيئة لـسرطان الدم الميلودي الحاد حيث وجد ان زيادة التعبير الجيني CALCRL مرتبطً بانخفاض معدل الهدأة الكاملة للمرض، وزيادة حدوث الانتكاس، وانخفاض إجمالي البقاء على قيد الحياة والبقاء على قيد الحياة بدون انتكاس، مما يجعل CALCRL هدفًا علاجيًا محتملاً في سرطان الدم الميلودي الحاد.
في هذه الدراسة، كنا نهدف إلى دراسة مستوى التعبير الجينى عن CALCRL في حالات سرطان الدم الميلودي الحاد حديثة التشخيص ، والتحقق من الدور المحتمل لـ CALCRL كعلامة تنبؤية سيئة في سرطان الدم الميلودي الحاد ودراسة الارتباط المحتمل بين التعبير الجيني CALCRL والبيانات السريرية ، والنتائج المختبرية، و العلامات التنبؤية الأخرى والاستجابة للعلاج.
تضمنت دراستنا 80 شخصًا بالغًا تم تشخيصهم حديثًا بسرطان الدم الميلودي الحاد. اشتملت الدراسة على 18 أنثى و 62 ذكرًا ، تراوحت أعمارهم بين 18 عامًا و 72 عامًا بمتوسط عمر 43.5 عامًا. تم قياس التعبير الجيني CALCRL بواسطة تفاعل البلمرة المتسلسل .تم العثور على اختلاف في تعبير CALCRL بين الحالات والاشخاص الطبيعيين حيث كان التعبير الجيني أعلى في الحالات من الاشخاص الطبيعيين ولكنه لم يصل إلى دلالة إحصائية.علاوة على ذلك، عند التحقيق في الارتباط المحتمل بين التعبير الجيني CALCRL والبيانات الديموغرافية، والبيانات السريرية، والنتائج المعملية، والعلامات التنبؤية الأخرى، والاستجابة للعلاج والبقاء على قيد الحياة ، وجد أنه لا يوجد ارتباط بين تعبير CALCRL والبيانات السابقة باستثناء MPO وتصنيف ال FAB وانتكاسة المرض حيث كان عدد الحالات الإيجابية لـ MPO أعلى في مجموعة التعبير الجيني CALCRL المنخفضة.
تم العثور على تعبير CALCRL مرتفع في حالات FAB-M2 بينما تم العثور على تعبير CALCRL منخفض في حالات FAB-M4. تشير هذه النتائج إلى دور CALCRL في تكوين الخلايا الجذعية المكونة للدم HSCS)) والخلايا الجذعية اللوكيميا LSCS)) وتشير إلى أن تعبير CALCRL المرتفع يشير إلي نمط ظاهري لـسرطان الدم الميلودي الحاد في مرحلة غير متمايزة. معدل حدوث الانتكاس كان أعلى مع انخفاض التعبير الجيني CALCRL. كشفت دراسة التأثير المشترك لتعبير CALCRL وعمر المرضى على البقاء على قيد الحياة بشكل عام والبقاء على قيد الحياة الخالية من الانتكاس أن البقاء على قيد الحياة بشكل عام كان أعلى بشكل ملحوظ في تعبير CALCRL المنخفض مع عمر <43.5 سنة.
التوصيات:
نظرًا لأن هذه الدراسة أجريت على 80 مريضًا من مرضى سرطان الدم الميلودي الحاد فقط ، فسيكون من المفيد إجراء الدراسة على مجموعة أكبر لتكون قادرًا على دراسة تعبير CALCRL في AML وارتباطه بالنتائج المختبرية والبيانات السريرية و العلامات التنبؤية الاخري والتحقق من تأثيره على توقعات سير المريض والبقاء على قيد الحياة في حالات سرطان الدم الميلودي الحاد.

Issues also as CD.

Text in English and abstract in Arabic & English.