Thesis (Ph.D)-Cairo University, 2021.

Bibliography: pages 136-157.

Cryopreservation is a lab technology where cells, tissues, or any other biological component predisposed to injurious insult resulting from disorganized chemical reactions are preserved by a cooling process to very low temperatures. Cryopreservation technology approach low temperature grades in order to prevent damage caused by formation of ice crystals all the way through the freezing process. Various research studies displayed and revealed evidence that embryos frozen and stored implementing slow-freezing technology results have more favorable IVF outcomes more than fresh embryos. Osmotic pulling out of a very large percentage of intracellular water before the cooling process, and not the permeation aspect of cryoprotectant in the cell, is a cornerstone factor for an efficient vitrification lab technique.
Vitrification lab technique is simple, and does not require expensive freezing tools, and relies mainly on the insertion of the embryo in a very small volume of vitrification medium that must be cooled at extreme rates not obtainable in classic enclosed cryostorage devices. Embryonic quality is chiefly assessed by microscopy using meticulous time points implementing a morphology system for grading. These usually enhance the conception rates.
There is research proof for the possible value of blastocoelic fluid reduction before the vitrification process. Blastocelic maturity at the time point of lab vitrification is a corner stone factor affecting ICSI outcomes .Significant differences in post-warming re-expansion, cell proliferation, and DNA damage have been displayed between expanded blastocysts undergoing artificial collapse before lab vitrification using the laser and revealing that the laser pulse causing minimal cell damage. Artificial collapse of embryos before vitrification is a fairly new technique for enhancing embryonic viability after vitrification. The theoretical basis for implementing this lab technique before starting the vitrification process is to avoid ice crystal damage by decreasing fluid within the embryonic cavity.
In the current research study the laser artificial shrinkage group displayed 75.3 % retrieval of high quality blastocysts after warming and needle AS showed 62.6 % and there was a statistical significant difference between both groups p value <0.001. Additionally as regards biochemical, clinical pregnancy and implantation rates, there was a statistical significance difference between both groups regarding positive β-hcg, clinical pregnancy, implantation, baby take home rate with p values = 0.007, 0.004, 0.005, 0.012, consecutively.

أن تجميد الأجنة أضحى أحد الركائز الأساسية فى مجال العقم وتأخر الأنجاب مما زاد الوعى لضرور الأهتمام بهذا المجال وتطويره كى يزيد من فرص وجودة الأجنة بعد فك التجميد, ومع زيادة فرص الأجنة للوصول لليوم الخامس خارج الرحم مما يتيح الفرصة لأختبار الأجود من تلك الأجنة بشكل أوضح. مع تقدم جودة الحضانات وأوساط الموجودة بها الأجنة كان لزاما التفكير فى طريقة حديثة تسمح بتجميد هذه الأجنة دون تكوين كريستالات ثلجية داخل ومن هنا ظهرت فكرة طريقة التجميد المفاجىء الحديثة.
طريقة التجميد المفاجىء الحديثة توفر تجميد لهذه الأجنة مع وجود مواد معينة تزيد من كثافة السيتوبلازم الخلوى مع حدوث تأثير تجفيف شديد يقلل من تكون الكريستالات الثلجية وقد وجد أن تقليل السائل بين الخلوى الموجود فى هذه الأجنة المتقدمة يزيد من فرص نجاح تجميد الأجنة.
أنكماش حجم الجنين بالطرق الحديثة ومنها أستعمال بعض الطرق الميكانيكية مثل بعض الماصات أو عن طريق أحداث ثقب فى الجدار الجينى بواسطة بعض أنواع الأبر ومؤخرا عن طريق أستعمال الليزر يؤدى الى أنجاح عملية تجميد أجنة متقدمة فى مرحلة الكيسة الاريمية ومع ظهور بعض الدراسات المقارنة بين الطرق الميكانيكية والليزر تبين وجود بعض الدلالات على ان نسب نجاة الأجنة بعد الفك ونسب الحمل الأكلينيكى وأنغراس الأجنة فى بطانة الرحم هى فى صالح الليزر وليست الطرق الميكانيكية التقليدية, حيث وجد أن نسبة أنكماش وخروج السائل البين الخلوي مع الليزر هو أبسط فى الأستعمال إلا أنه أكثر تكلفة وهى فى الأساس متمثلة في ثمن الجهاز المستخدم وفوق هذا فالليزر يتم إستخدامه أيضا بعد فك تجميد هذه الأجنة حيث يقلل هذا من الصلابة التى أكتسبها الغشاء المحيط بالأجنة بفعل عملية التجميد السابقة", ومع فك التجميد يتم عمل تقسيم للأجنة طبقا لدرجة جودتها ويتم بعد ذلك نقلها لرحم الزوجة.
وفى هذه الدراسة قمنا بعمل مقارنة شكل الأجنة بعد فكها من التجميد بشكلها ما قبل التجميد ونسبة الحمل بين مجموعتين من الأجنة المجموعة الأولى التي أستخدم الليزر بها لأنكماش كيسة اريمية ما قبل التجميد , بالمجموعة الثانية التي أستخدمنا بها الأبرة لتفريغ كيسة اريمية من السائل اللتى تحتويه ليتم أنكماشها قبل التجميد.
نتائج هذه الدراسة بالنسبة الي جودة الاجنة ما بعد التجميد فهي أعلي في المجموعة الأولي المستخدمة الليزر في أنكماش الأجنة ما قبل التجميد (٧٥٫٣٪) مقارنة بالأجنة في المجموعة الثانية المستخدمة الأبرة في أنكماش الأجنة ما قبل التجميد (٦٢٫٦٪).
هذا الفارق الأحصائي في صالح المجموعة الأولي ينطبق أيضا علي نتائج الحمل الكيمائي والأكلينيكي٬ كما ينطبق علي معدل أنغماس الأجنة بالرحم.
وأخيرا وليس أخرا المجموعة الأولي المستخدمة الليزر أعلي بقارق أحصائي واضح عن المجموعة الثانية المستخدمة الأبرة في معدل أكتمال الحمل وأخذ طفل للمنزل.
الأستنتاج النهائي لهذه الدراسة:
أن أنكماش الأجنة باستخدام الليزر ما قبل التجميديعتبر يعتبر تكنولوﭼيا واعدة للأستخدام علي نطاق أوسع لتحسين نتائج الأجنة المجمدة.
هذه الدراسة أثبتت أن أستخدام الليزر في أنكماش الاجنة ما قبل التجميد يعتبر تقنية بسيطة وسهلة الأستخدام٬ كما أن تأثيرها علي تلف بعض الخلايا الجنينية أقل بكثير مقارنة بأستخدام الأبرة في أنكماش الاجنة ما قبل التجميد، بل علي العكس استخدام الليزر في أنكماش الاجنة ما قبل التجميد له تأثير أيجابي علي انغماس الأجنة وزيادة الحمل سواء الكيمائي او الأكلينيكي.
كما أثبتت هذه الدراسة زيادة أحصائية واضحة في معدل أكتمال الحمل وأخذ طفل سليم للمنزل في المجموعة الأولي المستخدمة الليزر في أنكماش الاجنة ما قبل التجميد مقارنة بالمجموعة الثانية المستخدمة الأبرة في أنكماش الاجنة ما قبل التجميد، كما أثبت زيادة في معدل حدوث التواءم المتشابه في المجموعة المستخدمة الليزر في أنكماش الاجنة ما قبل التجميد ولكن ليس بفارق أحصائي واضح.

Issues also as CD.

Text in English and abstract in Arabic & English.