Thesis (M.Sc)-Cairo University, 2025.

Bibliography: pages 67-87.

The most common cause of anovulatory infertility is polycystic ovarian syndrome (PCOS), which is closely associated with obesity and metabolic syndrome. Artificial sweetener, notably saccharin sodium (SS), has been utilized in management of obesity in PCOS. However, accumulating evidence points towards SS deleterious effects on ovarian physiology, potentially through the activation of ovarian sweet and bitter taste receptors, culminating in a phenotype reminiscent of PCOS. This research embarked on exploration of SS influence on ovarian functions within a PCOS paradigm induced using letrozole. Rats were categorized into six groups: Control, Letrozole-model, two SS groups at 2 dose levels, and two groups receiving 2 doses of SS with Letrozole. The study underscored SS capability to potentiate PCOS-related anomalies. Elevated cystic profile with outer thin granulosa cells, were discernible. This owed to increased apoptotic markers as cleaved CASP-3, mirrored by high BAX and low BCL-2, with enhanced p38-MAPK/ERK1/2 pathway. This manifestation was accompanied by activation of taste receptors and disruption of steroidogenic factors; StAR, CYP11A1, and 17β-HSD. Thus, SS showed an escalation in testosterone, progesterone, estrogen, and LH/FSH ratio, insinuating a perturbation in endocrine regulation. It is found that there is an impact of taste receptor downstream signaling on ovarian steroidogenesis and apoptosis instigating pathophysiological milieu of PCOS.

الدراسة الحالية تبحث تأثير مستقبلات التذوق على الجرذان الطبيعية وجرذان متلازمة المبيض متعدد التكيسات التي يسببها ليتروزول.
في الدراسة الحالية، تم تحفيز متلازمة المبيض متعدد التكيسات في إناث الجرذان عن طريق إعطاء ليتروزول عن طريق الفم بجرعة (1 ملجم / كجم / يوم) لمدة 21 يوماً. في الوقت نفسه، تم استخدام سكرين الصوديوم بجرعة (0.14 أو 0.73 جم / كجم / يوم) كمنشط لمستقبلات التذوق. تم توزيع الجرذان عشوائيا في 6 مجموعات (8 جرذان في كل مجموعة) على النحو التالي:
• المجموعة الأولى: تلقت الجرذان (0.5٪ كربوكسي ميثيل السليلوز والماء المقطر عن طريق الفم) وعملت كمجموعة ضابطة.
• المجموعة الثانية: تلقت الجرذان ليتروزول عن طريق الفم بجرعة (1 ملجم / كجم / يوم) يوميا لمدة 21 يوما وكانت بمثابة نموذج لمتلازمة المبيض متعدد التكيسات.
• المجموعة الثالثة: تلقت الجرذان جرعة منخفضة من سكرين الصوديوم عن طريق الفم بجرعة (0.14 جم / كجم / يوم) يوميا لمدة 21 يوما.
• المجموعة الرابعة: تلقت الجرذان جرعة عالية من سكرين الصوديوم عن طريق الفم بجرعة (0.73 جم / كجم / يوم) يوميا لمدة 21 يوما.
• المجموعة الخامسة: تلقت الجرذان ليتروزول عن طريق الفم بجرعة (1 ملجم / كجم / يوم) مع جرعة منخفضة من سكرين الصوديوم (0.14 جم / كجم / يوم) يوميا لمدة 21 يوما.
• المجموعة السادسة: تلقت الجرذان ليتروزول عن طريق الفم بجرعة (1 ملجم / كجم / يوم) مع جرعة عالية من سكرين الصوديوم (0.73 جم / كجم / يوم) يوميا لمدة 21 يوما.
في نهاية الدراسة ولتقليل التقلبات الهرمونية، في مرحلة ديسترويس، تم تخدير الجرذان باستخدام ثيوبنتال بجرعة (85 مجم / كجم، بالحقن داخل الصفاق)، وتم جمع عينات الدم من الجيوب الأنفية خلف الحجاج في أنابيب شعرية بدون هيبارين لفصل المصل بعد الطرد المركزي. بعد ذلك، تم القتل الرحيم للجرذان، وتم استئصال المبايض وغسلها بمحلول ملحي مثلج. تم تثبيت المبيض الأيمن في 4٪ فورمالين لفحوصات الهيماتوكسيلين-ايوسين وكذلك فحوصات الكيمياء الهيستولوجية المناعية، بينما تم تخزين عينات المبيض الأيسر والمصل عند -80 درجة مئوية للتحليل الكيميائي الحيوي.
المؤشرات التي تم قياسها:
1. هرمون التستوستيرون
2. هرمون البروجستيرون
3. هرمون الاستروجين
4. الهرمون المنبه للجريب
5. هرمون اللوتين
6. فوسفوليباز سي بيتا 2
7. البروتين الستيرويدي الحاد

8. عائلة السيتوكروم بي 450 فصيلة فرعية 11 عضو 1
9. بيتا هيدروكسيستيرويد ديهيدروجيناز 17
10. أحادي فوسفات الأدينوزين الدوري
11. بيتا 38 بروتين كيناز المنشط بالميتوجين
12. كيناز منظم بالإشارة خارج الخلية 1/2
13. كاسباس -3 مشقوق
14. كاسباس -3
15. عائلة مستقبلات التذوق1 عضو 3
16. عائلة مستقبلات التذوق2 عضو 3
17. بروتين باكس
18. بروتين سرطان الغدد الليمفاوية للخلايا البائية 2
وفيما يلي موجز للنتائج الرئيسية لهذه الدراسة:
1. أظهرت جرعة عالية من سكرين الصوديوم عن طريق الفم أوزان جسم أعلى بكثير في الجرذان الطبيعية وزيادة مستحثة في وزن الجسم في جرذان متلازمة المبيض متعدد التكيسات التي يسببها ليتروزول.
2. تسبب سكرين الصوديوم بجرعة عالية في دورة استروسية غير منتظمة، تتميز بمرحلة دييستروس طويلة جنبًا إلى جنب مع زيادة عدد كريات الدم البيضاء والخلايا المتقرنة، وزيادة النسبة المئوية للدورة الشحمية غير الطبيعية في جرذان متلازمة المبيض متعدد التكيسات التي يسببها ليتروزول.
3. تم العثور على مستويات عالية من هرمونات الغدد التناسلية من هرمون التستوستيرون والإستروجين تحت جرعة منخفضة وعالية من الصوديوم سكرين، ولكن فقط الجرعة العالية أظهرت زيادة مستوى هرمون البروجسترون. أدت الجرعة العالية من سكرين الصوديوم إلى زيادة في الهرمونات السابقة في وجود متلازمة المبيض متعدد التكيسات وذلك أكثر من الزيادة التي يسببها ليتروزول وحده.
4. اختلال توازن هرمونات موجهة الغدد التناسلية تحت جرعات منخفضة وعالية من سكرين الصوديوم كما يتضح في الزيادة الكبيرة في مستوى هرمون اللوتين، ونسبة هرمون اللوتين / الهرمون المنبه للجريب. والجرعة العالية فقط سببت تفاقم في الزيادة التي يسببها ليتروزول وحده.
5. زادت العوامل المرتبطة بتكوين الستيرويد بما في ذلك البروتين الستيرويدي الحاد، عائلة السيتوكروم بي 450 فصيلة فرعية 11 عضو 1، وبيتا هيدروكسيستيرويد ديهيدروجيناز 17، في جرعات منخفضة وعالية من سكرين الصوديوم وزيادة مستوياتهم في مجموعات ليتروزول وذلك أعلى من مستوياتهمم في مجموعة الليتروزول وحده.
6. تم زيادة تعبير بروتينات مستقبلات الطعم الحلو (عائلة مستقبلات التذوق رقم 1 عضو3) ومستقبلات الطعم المر (عائلة مستقبلات التذوق رقم 2 عضو3) وإشارات المصب فوسفوليباز سي بيتا 2 وأحادي فوسفات الأدينوزين الدوري تحت جرعة منخفضة وعالية من سكرين الصوديوم.



7. أظهر التحقيق النسيجي المرضي المبيضي لجرعة منخفضة وعالية من سكرين الصوديوم في الجرذان الضابطة بنية مورفولوجية طبيعية جيدا مع الحد الأدنى من أشكال الأجسام المبرمج مع ارتفاع معدلات الجسم الأصفر الكبير. أظهرت جرعة منخفضة وعالية من سكرين الصوديوم في جرذان متلازمة المبيض متعدد التكيسات زيادة في عدد الخراجات المسامية المتوسعة مع سجلات أكثر وضوحا، والتغيرات التنكسية للخلايا الحبيبية الرقيقة وفقدان سلامة البويضات وذلك مقارنة بعينات جرذان متلازمة المبيض متعدد التكيسات. احتقان معتدل للأوعية الدموية بين المسامية وكذلك النخاعية مع عدد أقل نسبيا من الجسم الأصفر الأقدم.
8. كانت العلامات المؤيدة لموت الخلايا المبرمج مثل بروتين باكس ونسبة (بروتين باكس/ بروتين سرطان الغدد الليمفاوية للخلايا البائية 2) مرتفعة في مجموعات سكرين الصوديوم. من ناحية أخرى، تم تقليل العلامات المضادة لموت الخلايا المبرمج مثل مستوى بروتين سرطان الغدد الليمفاوية للخلايا البائية 2. جرعة عالية من سكرين الصوديوم الناجم عن زيادة ليتروزول في نسبة (بروتين باكس/ بروتين سرطان الغدد الليمفاوية للخلايا البائية 2). في الوقت نفسه، تعد نسبة (كاسباس المشقوق/كاسباس) مؤشراً مطبقًا على نطاق واسع لزيادة موت الخلايا المبرمج في مجموعات سكرين الصوديوم. جرعة عالية من سكرين الصوديوم الناجم عن زيادة ليتروزول في تعبير كاسباس المشقوق ونسبة كاسباس المشقوق/كاسباس.
9. مسار بيتا 38 بروتين كيناز المنشط بالميتوجين المنشط بسكرين الصوديوم. أظهرت جرعة منخفضة وعالية من سكرين الصوديوم زيادة بيتا 38 بروتين كيناز المنشط بالميتوجين وكيناز منظم بالإشارة خارج الخلية 1/2. أظهرت جرعة عالية من سكرين الصوديوم في وجود متلازمة المبيض متعدد التكيسات زيادة كبيرة في بيتا 38 بروتين كيناز المنشط بالميتوجين وكيناز منظم بالإشارة خارج الخلية 1/2 مقارنة بنسبتهم في مجموعة الليتروزول وحده.

الاستنتاجات:
اعتمادًا على النتائج المذكورة أعلاه، يمكن استنتاج ما يلي:
1. تفعيل مستقبلات التذوق إشارات المصب له علاقة محتملة في تفاقم متلازمة المبيض متعدد التكيسات.
2. الخلل في تكوين الستيرويد المبيض وموت الخلايا المبرمج له تأثير كبير على التسبب في متلازمة المبيض متعدد التكيسات.
3. هناك علاقة إيجابية بين تنشيط مستقبلات الذوق ومسار بيتا 38 بروتين كيناز المنشط بالميتوجين.
4. هناك علاقة إيجابية بين تنشيط مسار بيتا 38 بروتين كيناز المنشط بالميتوجين وموت الخلايا المبرمج في المبايض.
5. تم تعزيز التغيرات التنكسية للخلايا الحبيبية الخارجية الرقيقة بما في ذلك ارتفاع معدل الإصابة بالتهاب الخلايا المبرمج النووي، والأجسام المبرمج عن طريق تنشيط مستقبلات الذوق.
يوصى بتقليل استهلاك سكرين الصوديوم لدى النساء ذوات العوامل الوراثية المسببة لمتلازمة المبيض متعدد التكيسات لتجنب آثارها الضارة على صحة المرأة والإنجاب

Issues also as CD.

Text in English and abstract in Arabic & English.