Biotransformation of selected toxic pollutants using a recombinant laccase enzyme / (Record no. 178157)
[ view plain ]
| 000 -LEADER | |
|---|---|
| fixed length control field | 08199namaa22004451i 4500 |
| 003 - CONTROL NUMBER IDENTIFIER | |
| control field | EG-GICUC |
| 005 - أخر تعامل مع التسجيلة | |
| control field | 20260210125814.0 |
| 008 - FIXED-LENGTH DATA ELEMENTS--GENERAL INFORMATION | |
| fixed length control field | 260203s2025 ua a|||frm||| 000 0 eng d |
| 040 ## - CATALOGING SOURCE | |
| Original cataloguing agency | EG-GICUC |
| Language of cataloging | eng |
| Transcribing agency | EG-GICUC |
| Modifying agency | EG-GICUC |
| Description conventions | rda |
| 041 0# - LANGUAGE CODE | |
| Language code of text/sound track or separate title | eng |
| Language code of summary or abstract | eng |
| -- | ara |
| 049 ## - Acquisition Source | |
| Acquisition Source | Deposit |
| 082 04 - DEWEY DECIMAL CLASSIFICATION NUMBER | |
| Classification number | 616.01 |
| 092 ## - LOCALLY ASSIGNED DEWEY CALL NUMBER (OCLC) | |
| Classification number | 616.01 |
| Edition number | 21 |
| 097 ## - Degree | |
| Degree | M.Sc |
| 099 ## - LOCAL FREE-TEXT CALL NUMBER (OCLC) | |
| Local Call Number | Cai01.08.06.M.Sc.2025.Ma.B |
| 100 0# - MAIN ENTRY--PERSONAL NAME | |
| Authority record control number or standard number | Marina Refaat Wanis, |
| Preparation | preparation. |
| 245 10 - TITLE STATEMENT | |
| Title | Biotransformation of selected toxic pollutants using a recombinant laccase enzyme / |
| Statement of responsibility, etc. | by Marina Refaat Wanis ; Supervision Prof. Dr. Nayera Ahmed Moneib, Prof. Dr. Marwa T. ElRakaiby, Dr. Mohamed H. Habib. |
| 246 15 - VARYING FORM OF TITLE | |
| Title proper/short title | المعالجة البيولوجية لبعض الملوثات السامة باستخدام إنزيم اللاكيز المؤتلف |
| 264 #0 - PRODUCTION, PUBLICATION, DISTRIBUTION, MANUFACTURE, AND COPYRIGHT NOTICE | |
| Date of production, publication, distribution, manufacture, or copyright notice | 2025. |
| 300 ## - PHYSICAL DESCRIPTION | |
| Extent | 104 pages : |
| Other physical details | illustrations ; |
| Dimensions | 25 cm. + |
| Accompanying material | CD. |
| 336 ## - CONTENT TYPE | |
| Content type term | text |
| Source | rda content |
| 337 ## - MEDIA TYPE | |
| Media type term | Unmediated |
| Source | rdamedia |
| 338 ## - CARRIER TYPE | |
| Carrier type term | volume |
| Source | rdacarrier |
| 502 ## - DISSERTATION NOTE | |
| Dissertation note | Thesis (Ph.D)-Cairo University, 2025. |
| 504 ## - BIBLIOGRAPHY, ETC. NOTE | |
| Bibliography, etc. note | Bibliography: pages 79-104. |
| 520 #3 - SUMMARY, ETC. | |
| Summary, etc. | Industrial dyes, aromatic amines, and phenolic compounds are persistent pollutants that are <br/>difficult to remove using conventional methods. Laccases offer a green alternative, but <br/>recombinant expression and scalable applications remain limited. Laccases are blue-colored <br/>enzymes that contain multiple copper atoms and are known for their ability to decolorize dyes and <br/>perform free radical polymerization reactions. Using a recombinant pBAD plasmid containing the <br/>gene for expression of Bli-Lacc, a laccase from Bacillus licheniformis ATCC 9945a, we managed <br/>to successfully express the enzyme using chemo competent TOP10 E. coli cells. Purification of <br/>the enzyme was performed using immobilized metal affinity chromatography (IMAC) utilizing <br/>Ni-resin for His-tag purification. The enzyme demonstrated activity towards laccase substrates <br/>such as 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) and syringaldazine <br/>(SGZ). Kinetic constants showed that the Km for ABTS and SGZ was 1.05 ± 0.16 mM and 0.204 <br/>± 0.014 mM while the kcat was 9.04 ± 0.52 min-1 and 12.96 ± 0.3 min-1, respectively. After activity <br/>confirmation, the enzyme was tested for its ability to biotransform a range of substrates including <br/>azodyes (Acid Red 183 and Congo Red), an aromatic amine (aniline), and phenolic compounds <br/>(o-chlorophenol and β-naphthol). Out of the tested substrates, the enzyme showed an ability to <br/>polymerize β-naphthol and the reaction produced a brown solid. Using 1H NMR, 13C NMR and <br/>FTIR, we confirmed the chemical structure of the resulting polymer. Solid-state NMR showed two <br/>types of hydroxyl groups and a very small number of ether bonds (less than 2%). This indicated <br/>that polymerization mainly happened on the aromatic ring carbons, not the ones attached to <br/>hydroxyl groups, forming a compact, multi-ring structure. Stepwise optimization of the <br/>polymerization showed that the best conditions producing maximum polymer yield, as determined <br/>using OD600nm measurement and dry weight, were 37 °C, pH 10, and 1000 nM enzyme <br/>concentration in 50 mM phosphate buffer. A 100 milligram-scale conversion of β-naphthol <br/>produced 40 mg net weight dry polymer showcasing an almost 40% yield. Overall, this study <br/>demonstrates a green, enzyme-based method for converting phenolic compounds into potentially <br/>useful polymers. |
| 520 #3 - SUMMARY, ETC. | |
| Summary, etc. | تُعد إنزيمات اللاكيز إنزيمات زرقاء اللون تحتوي على عدة ذرات نحاسية، وتُعرف بقدرتها على إزالة لون الأصباغ وإجراء تفاعلات البلمرة عبر الجذور الحرة وفي هذه الدراسة تم التعبير عن إنزيم Bli-Lacc، وهو إنزيم لاكيز مشتق من بكتريا Bacillus licheniformis، باستخدام بلازميد مؤتلف من نوع pBAD يحتوي على الجين المسؤول عن تكوين الانزيم، وذلك في خلايا E. coli TOP10 الكفؤة كيميائيًا. تم تنقية الإنزيم باستخدام كروماتوجرافيا البروتين اعتمادا على سلسلة الهيستيدين المتصلة بجين اللاكيز لتنقية البروتين وأظهر الإنزيم نشاطًا تجاه ركائز اللاكيز مثل ABTS وSGZ، وتم تحديد الثوابت الحركية حيث بلغ ثابت ميخايليس-منتن (Km) لكل من ABTS و SGZ حوالي 1.05 ± 0.16 مليمول و0.204 ± 0.014 مليمول على التوالي، بينما بلغت قيم التحول الحفزي (kcat) حوالي 9.04 ± 0.52 و12.96 ± 0.3 دقيقة⁻¹علىالترتيب.<br/>بعد تأكيد النشاط الإنزيمي، تم اختبار قدرة الإنزيم على تحويل مجموعة من المركبات تشمل أصباغ الآزو (مثل Acid Red 183 وCongo Red، ومركب أليفاتي عطري (الأنيلين)، ومركبات فينولية مثل o- chlorophenol و β-naphthol ومن بين جميع المركبات، أظهر الإنزيم قدرة على بلمرة β-naphthol، وأدى التفاعل إلى تكوين مادة صلبة بنية اللون.<br/>تم تأكيد التركيب الكيميائي للبوليمر الناتج باستخدام تقنيات التحليل الطيفي، بما في ذلك الرنين المغناطيسي النووي للهيدروجين والكربون H1NMR) و C13 NMR) بالإضافة إلى مطيافية الأشعة تحت الحمراء(FTIR).<br/>وقد بيّنت بيانات NMR في الحالة الصلبة وجود نوعين من مجموعات الهيدروكسيل وعدد قليل جدًا من روابط الإيثر (أقل من 2%)، مما يشير إلى أن البلمرة حدثت بشكل رئيسي على ذرات الكربونفي الحلقة العطرية، وليس على الذرات المرتبطة بمجموعات الهيدروكسيل، منتجة بنية مدمجة متعددة الحلقات.<br/>أظهرت عملية تحسين التفاعل أن أفضل ظروف لإنتاج أعلى كمية من البوليمر حسب قياسات OD عند 600 نانومتر والوزن الجاف) كانت عند درجة حرارة 37 درجة مئوية، و الأس الهيدروجيني 10 ، وتركيز إنزيم 1000 نانومول في محلول فوسفات بتركيز 50 مليمول.<br/>ولأغراض التوسع الصناعي، تمت محاولة تحويل كمية 1 غرام من الركيزة، ولكن نظرًا لانخفاض إنتاجية الإنزيم، تم تنفيذ التفاعل باستخدام 100 ملغم من β-naphthol ، ثم تم إسقاط النتائج على مقياس 1 غرام وقد نتج عن تفاعل الـ100 ملغم حوالي 40 ملغم بوليمر جاف، ما يعادل تقريبًا 40% من العائد الكلي.<br/>بشكل عام، تُظهر هذه الدراسة طريقة خضراء قائمة على استخدام الإنزيمات لتحويل المركبات الفينولية إلى بوليمرات قد تكون ذات قيمة تطبيقية ومستدامة. |
| 530 ## - ADDITIONAL PHYSICAL FORM AVAILABLE NOTE | |
| Issues CD | Issues also as CD. |
| 546 ## - LANGUAGE NOTE | |
| Text Language | Text in English and abstract in Arabic & English. |
| 650 #0 - SUBJECT ADDED ENTRY--TOPICAL TERM | |
| Topical term or geographic name entry element | Microbiology and Immunology |
| 650 #0 - SUBJECT ADDED ENTRY--TOPICAL TERM | |
| Topical term or geographic name entry element | الميكروبيولوجيا والمناعة |
| 653 #1 - INDEX TERM--UNCONTROLLED | |
| Uncontrolled term | Bacillus licheniformis |
| -- | laccase |
| -- | β-naphthol |
| -- | recombinant protein expression |
| -- | enzyme purification |
| -- | polymerization |
| -- | green chemistry |
| -- | biotransformation |
| -- | انزيم الاكيز |
| -- | بيتا نفثول |
| 700 0# - ADDED ENTRY--PERSONAL NAME | |
| Personal name | Nayera Ahmed Moneib |
| Relator term | thesis advisor. |
| 700 0# - ADDED ENTRY--PERSONAL NAME | |
| Personal name | Marwa T. ElRakaiby |
| Relator term | thesis advisor. |
| 700 0# - ADDED ENTRY--PERSONAL NAME | |
| Personal name | Mohamed H. Habib |
| Relator term | thesis advisor. |
| 900 ## - Thesis Information | |
| Grant date | 01-01-2025 |
| Supervisory body | Nayera Ahmed Moneib |
| -- | Marwa T. ElRakaiby |
| -- | Mohamed H. Habib |
| Universities | Cairo University |
| Faculties | Faculty of Pharmacy |
| Department | Department of Microbiology and Immunology |
| 905 ## - Cataloger and Reviser Names | |
| Cataloger Name | Shimaa |
| Reviser Names | Eman Ghareb |
| 942 ## - ADDED ENTRY ELEMENTS (KOHA) | |
| Source of classification or shelving scheme | Dewey Decimal Classification |
| Koha item type | Thesis |
| Edition | 21 |
| Suppress in OPAC | No |
| Source of classification or shelving scheme | Home library | Current library | Date acquired | Inventory number | Full call number | Barcode | Date last seen | Effective from | Koha item type |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Dewey Decimal Classification | المكتبة المركزبة الجديدة - جامعة القاهرة | قاعة الرسائل الجامعية - الدور الاول | 03.02.2026 | 93281 | Cai01.08.06.M.Sc.2025.Ma.B | 01010110093281000 | 03.02.2026 | 03.02.2026 | Thesis |