Monitoring of aflatoxins in some dairy products and their substitutes /
مراقبة سموم الأفلاتوكسين في بعض منتجات الألبان وبدائلها
by Abdel-Kareem Hamed Adam Abdel-latif ; Supervision Prof. Dr. Salwa Ahmed Mohamed Aly, Prof. Dr. Mena Fouad Saad, Prof. Dr. Rasha Hamza Sayed-ElAhl.
- 74 pages : illustrations ; 25 cm. + CD.
Thesis (Ph.D)-Cairo University, 2025.
Bibliography: pages 60-74.
Although dairy products are more exposed to mold growth and aflatoxins contamination, dairy substitutes are also at risk. In this regard, investigation of mold occurrence, identification of prevailing molds and monitoring of aflatoxins levels via ELISA were accomplished on 210 samples of Ras cheese, plain yogurt flavored yogurt, milk powder, milk-based cereals, cheese analogues (soft cheese with vegetable fats), and cream analogues (30 samples each) obtained from various markets in El-Fayoum province, Egypt. In addition, this research aimed to examine the capability of chitosan nanoparticles (CNPs)/nano-chitosan and clay bentonite CB) experimentally to absorb or eliminate aflatoxin M1 (AFM1) in Ultra heat treated (UHT) milk and their effect on its sensory and compositional attributes. The obtained results revealed that the highest mold contamination was found in the examined Ras cheese (73.3%) with the lowest compliance to the Egyptian Standards (ES:1007-5/2005). Moreover, the lowest contamination percentage was found in cream analogue samples (33.3%). Aspergillus spp. was the most isolated mold (54.5%), followed by Rhizopus (22.8%) Penicillium (13.1%), Mucor (4.8%), Alternaria (3.4%), and Ulocladium (1.4%). Aspergillus flavus characterization by PCR revealed that 100.0% of the isolates were confirmed, while 85.3% harbored the aflatoxin B1 aflR gene. Aflatoxin M1 was detected in Ras cheese, plain yogurt, flavored yogurt, milk powder, and milk-based cereals samples with mean values of 89.05±6.21, 63.42±5.04, 48.71±2.65, 51.70±2.55, and 35.22±3.36 ng/kg, respectively. Total aflatoxins were measured in cheese analogue and cream analogue samples with mean levels of 12.32±1.58 and 7.46±0.45 µg/kg, respectively. UHT milk was spiked with AFM1 (95 ng/L) with addition of different concentrations of nano-chitosan and clay bentonite (0.25%, 0.5%, and 1.0%). The percentage of AFM1 was reduced by 64.5%, 76.3%, and 80.2% at 0.25%, 0.5%, and 1.0% of nano-chitosan respectively. Regarding clay bentonite, the concentration was reduced by 21.7%, 34.2%, and 38.6% at 0.25% 0.5%, and 1.0% concentrations, respectively. Results indicated significant differences (p<0.05) in AFM1 reduction among different concentrations of nano-chitosan and clay bentonite. On the other hand, there were no significant differences (p>0.05) in the flavor, color, and appearance of the treated milk samples with both adsorbents, as well as protein, fat, lactose, solids not-fat, ash, acidity percentages, and pH. From the result obtained, it could be concluded that a great portion of the examined samples contained not only varying levels of mold but also their aflatoxins which pose health risks to humans, especially children who are more susceptible to aflatoxin toxicity. Moreover, Nano-chitosan can be regarded as the most effective adsorbent materials for the removal of AFM1 in artificially contaminated UHT milk and could thus be a promising candidate for the detoxification of AFM1 in the future. The challenge lies in adopting a holistic approach that combines prevention of mold growth and detoxification of aflatoxins to address food safety concern in both dairy products and their substitutes. على الرغم من أن منتجات الألبان أكثر عرضة لنمو العفن والتلوث بالأفلاتوكسينات، فإن بدائل الألبان معرضة للخطر أيضًا. في هذا الصدد، تم إجراء تحقيقات حول ظهور العفن، تحديد أنواع العفن السائدة، ومراقبة مستويات الأفلاتوكسينات بواسطة الإليزا (ELISA) على 210 عينة من جبن راس، زبادي عادي، وزبادي منكه، وحليب مجفف، وحبوب أساسها الحليب، بدائل الجبن (جبن طري مع دهون نباتية)، وبدائل القشدة (30 عينة من كل نوع) تم الحصول عليها من أسواق مختلفة في محافظة الفيوم، جمهورية مصر العربية. علاوة على ذلك، تم التحكم في أفلاتوكسين اللبن (AFM1) في الحليب المعقم (UHT) عبر النانو-شيتوزان وطين البنتونيت، مع تقييم آثارهما على خصائصه الحسية والتكوينيه. وقد وجدت أعلى نسبة تلوث بالعفن في جبن راس (73.3٪) مع أقل امتثال للمعايير المصرية (ES:1007-5/2005)، علاوة على ذلك، وجدت أدنى نسبة تلوث في عينات بدائل القشدة (33.3٪).(ES:1599/2005) كما أظهرت النتائج ان عائلة الاسبرجلس كانت الأكثر عزلًا بنسبة (54.5٪)، يليه أنواع أخرى مثل الريزوبس (22.8%)، بنسيليوم (13.1%)، ميوكور (4.8%)، الترناريا (3.4%)، واولوكلاديوم بنسبة (1.4%). أظهر توصيف معزولات الاسبرجلس فلافس بواسطة اختبار تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) أن 100.0٪ من العزلات تم تأكيدها، بينما احتوت نسبة 85.3٪ من المعزولات على جين الأفلاتوكسين aflR B1. وقد تم الكشف عن أفلاتوكسين اللبن في عينات جبن راس، الزبادي العادي، الزبادي المنكه، الحليب مجفف، والحبوب أساسها الحليب، بمتوسط قيم 89.05±6.21، 63.42±5.04، 48.71±2.65، 51.70±2.55، و35.22±3.36 نانوجرام/كجم، على التوالي. تم قياس إجمالي الأفلاتوكسين في عينات بدائل الجبن وبدائل القشدة بمتوسط مستويات 12.32±1.58 و7.46±0.45 ميكروجرام/كجم على التوالي. تمت إضافة أفلاتوكسين اللبن (95 نانوجرام/لتر) إلى حليب البقر المعقم (UHT) مع إضافة تركيزات مختلفة من النانو-شيتوزان وطين البنتونيت (0.25٪، 0.5٪، و1.0٪). أشارت النتائج إلى وجود فروق ذات دلالة إحصائية (p<0.05) في انخفاض مستوى أفلاتوكسين اللبن بين التركيزات المختلفة من النانو-شيتوزان وطين البنتونيت. انخفض مستوى أفلاتوكسين اللبن بنسبة 64.5٪، 76.3٪، و80.2٪ عند 0.25٪، 0.5٪، و1.0٪ من النانو-شيتوزان على التوالي. بالنسبة للبنتونيت، انخفض المستوى بنسبة 21.7٪، 34.2٪، و38.6٪ عند تركيزات 0.25٪، 0.5٪، و1.0٪ على التوالي. لم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية (p>0.05) في نكهة ولون ومظهر عينات الحليب المعالجة بكلا الماصين، وكذلك البروتين، الدهون، اللاكتوز، المواد الصلبة غير الدهنية، الرماد، نسب الحموضة، والأس الهيدروجيني. في الختام، احتوت نسبة كبيرة من العينات التي تم تقييمها ليس فقط على مستويات متفاوتة من العفن، بل أيضًا على الأفلاتوكسينات والتي تشكل خطرا صحيا على البشر وخاصة الأطفال الاكثر عرضة لتسمم الأفلاتوكسين. ولهذا يُمكن اعتبار النانو شيتوزان أكثر المواد الماصة فاعليه لإزالة أفلاتوكسين اللبن من الحليب المعقم الملوث معمليًا، وبالتالي يُمكن أن يكون مرشحًا واعدًا في المستقبل. ولذلك فان التحدي الحقيقي يكمن في تبني نهج شامل يجمع بين منع نمو العفن وإزالة سموم الأفلاتوكسينات لمعالجة مخاوف سلامة الغذاء في منتجات الألبان وبدائلها.