12140namaa22004451i 4500 EG-GICUC 20260510154451.0 260510s2026 ua a|||frm||| 000 0 eng d EG-GICUC eng EG-GICUC EG-GICUC rda eng eng ara Deposit 615.788 615.788 21 M.Sc Cai01.08.09.M.Sc.2026.Mi.P Mira Latif Sabry Henein, preparation. Possible pharmacological approaches to safeguard ovarian reserve post-cyclophosphamide-induced premature ovarian failure / by Mira Latif Sabry Henein ; Supervision Prof. Dr. Azza Mounir Agha, Prof. Dr. Nesrine Salah El Dine, Dr. Ahmed Seif El Din Kamel. الأساليب الدوائية الممكنة لحماية احتياطي المبيض بعد فشل المبيض المبكر المحدث بالسيكلوفوسفاميد 2026. 75 pages : illustrations ; 25 cm. + CD. text rda content Unmediated rdamedia volume rdacarrier Thesis (M.Sc)-Cairo University, 2026. Bibliography: pages 61-75. Background: One of the main side effects of chemotherapy, particularly when alkylating drugs like Cyclophosphamide (CYC) are used, is premature ovarian insufficiency (POI). For women of reproductive age receiving cancer treatment, the loss of ovarian follicles, hormonal instability, and associated infertility represent serious issues. Consequently, it is crucial to identify pharmaceutical approaches that preserve the ovarian reserve. Aim of the Study: The purpose of this study was to investigate the effects of the metabolic modulator Metformin and the PI3K inhibitor Wortmannin on hormonal, histological, and molecular markers associated with the PI3K/AKT/mTOR signaling system, as well as to assess the protective impact of both drugs against CYC-induced POI in female rats. Methods: Four groups of forty-eight adult female rats were established: the normal control group, the CYC group, theWortmannin-treated group, and the Metformin-treated group. Body weight was monitored weekly throughout the experimental period. Serum levels of FSH, LH, estradiol, AMH, and ovarian protein levels of mTORC1, mTORC2, FOXO3a, 4EBP1, and S6K1 were measured using ELISA. The expression of PI3K, AKT, mTOR, RPS6, c-KIT, KIT ligand (KITL), YAP, TAZ were analyzed by Western blotting. Apoptosis was evaluated by detecting caspase-3 expression using immunohistochemistry. Ovarian reserve was assessed by ovarian weight measurement and histological examination of follicular populations, while fertility outcomes were determined through a mating trial conducted at the end of the study. Results: A POI-like syndrome marked by increased FSH and LH levels, decreased estradiol concentrations, and widespread follicular atresia with stromal degeneration was brought on by CYC therapy. The PI3K/AKT/mTOR–Hippo signaling pathway was markedly activated in conjunction with these changes, as evidenced by elevated expression of its major mediators. These side effects were considerably lessened by using Metformin or Wortmannin, which improved ovarian morphology and restored hormonal equilibrium. In contrast to the atrophic ovaries of the CYC group, the follicular population was maintained by both treatments, exhibiting a more ordered distribution of primordial, primary, and developing follicles. Comparable protective effects were shown by the two medications, indicating that PI3K/AKT/mTOR pathway regulation is essential for preserving follicular homeostasis and reducing ovarian dysfunction brought on by chemotherapy. Conclusion: The results suggest that CYC-induced premature ovarian insufficiency is largely driven by dysregulation of the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway and the resulting follicular burnout. Both Wortmannin and Metformin significantly mitigated this damage by restoring hormonal balance, preserving follicular structure, and improving fertility outcomes. Their protective effects were associated with modulation of interconnected signaling networks including PI3K/AKT, mTOR, and Hippo that regulate follicular activation and survival. These findings indicate that pharmacological targeting of this pathway offers a promising and accessible strategy for fertility preservation during chemotherapy, with Wortmannin and Metformin serving as effective and potentially complementary therapeutic alternatives. عند استخدام العقارات المدمرة مثل عقار السيكلوفوسفاميد، لما له من تأثيرات سامة تؤدي إلى فقدان حويصلات المبيض واضطراب التنظيم الهرموني. وتُسهم هذه التغيرات في زيادة معدلات العقم وحدوث مضاعفات طويلة الأمد لدى النساء في سنّ الإنجاب المصابات بالسرطان. ومن هذا المنطلق، تكتسب دراسة الاستراتيجيات الدوائية الوقائية التي تستهدف الحفاظ على المخزون الجريبي للمبيض وحماية الخصوبة أهمية بالغة في الممارسة العلاجية الحديثة. هدفت هذه الدراسة إلى تقييم تأثير كلٍّ من المنظِّم الأيضي الميتفورمين ومثبط PI3K الورتمنين (Wortmannin) على المؤشرات الهرمونية، والنسيجية، والجزيئية المرتبطة بمسار الإشارة PI3K/AKT/mTOR، إضافة إلى تقييم التأثير الوقائي لكلا العقارين ضد القصور المبكر في وظائف المبيض الناتج عن السيكلوفوسفاميد في إناث الجرذان. تم تقسيم ثمانٍ وأربعين أنثى من الجرذان البالغين إلى أربع مجموعات: مجموعة الضبط الطبيعية، مجموعة السيكلوفوسفاميد، مجموعة الورتمنين ومجموعة الميتفورمين. وتم قياس وزن الجسم أسبوعيًا طوال فترة التجربة. تم تقدير العوامل الآتية １- مستويات الهرمونات FSH و LH والإستراديول و الهرمون المضادّ لمولِّر في مصل الدم ２- مستويات بروتينات لكل mTORC1 وmTORC2 وFOXO3a و4EBP1 وS6K1 باستخدام تقنية ELISA في المبيض. ３- تحليل بروتيني لكل من PI3K ،AKT ، mTOR، RPS6 وKIT ، KIT ligand، YAP وTAZ، إلى جانب الوسائط النهائية مثل 4EBP1وS6K1، باستخدام تقنية الويسترن. ４- تم تقييم الموت الخلوي المبرمج من خلال الكشف عن تغييرات الكاسباز-3 باستخدام تقنية الكيمياء المناعية النسيجية. ５- تقييم الاحتياطي المبيضي من خلال قياس وزن المبيض والفحص النسيجي لمختلف مراحل الحويصلات تحديد نتائج الخصوبة عن طريق اختبار التزاوج الذي أُجري في نهاية الدراسة.6- تم تقييم نتائج الخصوبة من خلال إجراء اختبار التزاوج في نهاية فترة الدراسة لتقييم الكفاءة الإنجابية الوظيفية للإناث في المجموعات التجريبية المختلفة. حيث تم وضع كل أنثى مع ذكرين بالغين سليمين ذوي خصوبة مثبتة بنسبة 2:1 (ذكران : أنثى واحدة) في أقفاص منفصلة، وذلك لضمان كفاءة التزاوج وتقليل احتمالية فشل الإخصاب المرتبط بعوامل ذكرية. تم فحص الإناث يوميًا للتأكد من حدوث التزاوج، إما من خلال ملاحظة السدادة المهبلية (vaginal plug) أو من خلال تأكيد حدوث الحمل. بعد ذلك، تم تسجيل نسبة حدوث الحمل وعدد الإناث الحوامل في كل مجموعة. سلامة المبيض وجودة البويضات. وعند اكتمال فترة الحمل، تم تسجيل عدد الصغار المولودين لكل أنثى، واستخدام هذه البيانات لحساب متوسط حجم الخلفة لكل مجموعة، باعتباره مؤشرًا مباشرًا على الخصوبة والقدرة التناسلية، ويعكس التأثير الوظيفي النهائي للعلاجات المختلفة على أدى العلاج بالسيكلوفوسفاميد إلى حدوث متلازمة تشبه القصور المبكر في وظائف المبيض، تمثلت في ارتفاع مستويات هرموني FSH وLH، وانخفاض تركيز الإستراديول، وحدوث ضمور واسع في الحويصلات مع تنكس سُدوي ملحوظ. وتزامنت هذه التغيرات مع تنشيط واضح لمسارPI3K/AKT/mTOR–Hippo وقد أدى العلاج بكل من الميتفورمين والورتمنين إلى التخفيف الملحوظ من هذه التأثيرات الضارة، حيث حسّنا من البنية النسيجية للمبيض وأعادا التوازن الهرموني. وعلى عكس الضمور الملحوظ في مبايض مجموعة السيكلوفوسفاميد، حافظت المجموعات المعالجة على انتظام مختلف مراحل الحويصلات، مع توزيع منظم الحويصلات البدائية والأولية والمتطورة. كما أظهر العقاران تأثيرات وقائية متقاربة، مما يشير إلى أن تنظيم مسار PI3K/AKT/mTOR يُعد عنصرًا أساسيًا في الحفاظ على الاتزان الحويصلات وتقليل الاضطرابات المبيضية الناتجة عن العلاج الكيميائي. تشير هذه النتائج إلى أن القصور المبكر في وظائف المبيض الناجم عن السيكلوفوسفاميد يرتبط بشكل رئيسي باضطراب تنظيم مسار PI3K/AKT/mTOR وما يترتب عليه من استنزاف مخزون المبايض. وقد أظهر كل من الورتمنين والميتفورمين قدرة فعّالة على تقليل هذا الضرر من خلال استعادة التوازن الهرموني، والحفاظ على البنية الجريبية، وتحسين مؤشرات الخصوبة. وارتبطت هذه التأثيرات الوقائية بتعديل شبكات الإشارة المترابطة التي تشمل مسارات PI3K/AKT وmTOR وHippo، والمسؤولة عن تنظيم تنشيط الحويصلات وبقائها. وتشير هذه النتائج إلى أن الاستهداف الدوائي لهذه المسارات يمثل استراتيجية واعدة وسهلة التطبيق للحفاظ على الخصوبة أثناء العلاج بالسيكلوفوسفاميد، مع اعتبار الورتمنين والميتفورمين كخيارين علاجيين فعّالين وربما متكاملين. Issues also as CD. Text in English and abstract in Arabic & English. Pharmacology and Toxicology الأدوية والسموم Premature Ovarian Insufficiency (POI) Cyclophosphamide Chemotherapy-Induced Gonadotoxicity Ovarian Reserve PI3K/AKT/mTOR Signaling Pathway Follicular Activation Azza Mounir Agha thesis advisor. Nesrine Salah El Dine thesis advisor. Ahmed Seif El Din Kamel thesis advisor. 01-01-2026 Azza Mounir Agha Nesrine Salah El Dine Ahmed Seif El Din Kamel Cairo University Faculty of Pharmacy Department of Pharmacology and Toxicology Shimaa ddc TH 21 0 180086 ddc 317972 CUCL cl210 2026-05-10 94002 Cai01.08.09.M.Sc.2026.Mi.P 01010110094002000 2026-05-10 14:45:16 2026-05-10 TH