Thesis (M.Sc.) - Cairo University - Faculty of Veterinary Medicine - Department of Theriogenology

Bibliography: p. 143-171.

Different traits of cryopreservation of canine epididymal sperm have been studied for different breeds of dogs. Studies were conducted on epididymal sperm (132 dogs) during the period from February 2021 till September 2021. Five studies were done to investigate some factors affecting cryopreservation of epididymal dog sperm, such as the effect of different collecting methods of epididymal dog spermatozoa (mincing and flushing), type of extenders (OptiXcell, INRA 96 and Tris egg yolk fructose extenders) and type of cryoprotectants [glycerol, dimethyl sulfoxide (DMSO), dimethyl formamide (DMF)], egg yolk from different avian species (chicken, duck and quail), the effect of addition of ascorbic acid (0.45, 0.90 mg/ml), melatonin (0.002, 0.0035 mol/L) and zinc oxide nanoparticles (100, 200 og/ml) respectively to cryopreservation medium of Tris extender on epididymal dog sperm cryo survival. Results were evaluated by post-thaw sperm motility and viability, sperm acrosomal integrity, sperm membrane integrity and sperm DNA integrity. It was found that there was no significant difference between mincing and flushing methods on epididymal dog spermatozoa, although the mincing method was more practical and quick. OptiXcell can successfully be used to freeze canine epididymal spermatozoa, and DMSO (7%) could be used as an alternative to glycerol in Tris-based extenders. Quail egg yolk improved freeze-thaw sperm quality compared to egg yolk from chicken and duck. Addition of either ascorbic acid (0.90 mg/ml), melatonin (0.0035 mol/L) or ZnONPs (100 og/ml) to Tris extenders resulted in a significant increase in the percentage of motility, viability, membrane intact, and acrosome-intact dog epididymal sperm, as well as the maintenance of DNA integrity and the reduction of lipid peroxidation at the membrane level. Further studies are required to assess their effect on fertility

اجرى هذا البحث بهدف دراسة تأثير طريقة التجميع، نوع المخفف، نوع واقى التجميد، نوع صفار البيض، تركيز و نوع مضادات الاكسدة على خصائص حيامن البربخ بعد التجميد والاسالة.
تم استخدام 264 خصية من 132 كلب من سلالات مختلفة (عمر 2 – 5 سنين، وزن 25 – 45 كيلوجرام)بعد اخصائهم فى مأوى الجمعية المصرية للرحمة بالحيوان. بعد الإخصاء، تم حفظ الخصية والبربخ والسترات المحيطة عند 4 درجات مئوية لمدة 12 ساعةفى 0.9٪ من كلوريد الصوديوم معقم قبل إحضارها إلى المعمل.تمت إزالة الستر من كل خصية للمعالجة ، مع الحرص بشكل خاص على عدم الإضرار بالبربخ حيث يتصل بالخصية. تم تشريح ذيل البربخ من كل خصية.
ولتحقيق الهدف اجريت خمس دراسات كالتالى:
الدراسة الأولى:
تم اجراء هذة الدراسة لمعرفة أولا تاثير طريقة تجميع الحيامن من برابخ الكلاب (التجربة الأولى)، نوع المخفف (التجربة الثانية)، نوع واقى التجميد (التجربة الثالثة) على جودة الحيامن بعد التجميد والاسالة.
التجربة الأولى: تم جمع الحيامن من ذيل البربخ الأيمن والأيسر لـ 21 كلبًا باستخدام طرق mincing أو flushing.تم إجراء ذلك باستخدام تقنية واحدة على إحدى الخصيتين والأخرى على الخصية الأخرى.تم تخفيف الحيامين المجمعة باستخدام مخفف تريس سترات الفركتوزإلى تركيز نهائي قدره 300 ×106 حيوان منوي / مل. تم تبريد العينات المخففة تدريجيًا إلى 5 درجات مئوية وتم الاحتفاظ بها عند درجة الحرارة هذه لمدة ساعتين لتتأقلم ، وتعبئتها في 0.25 مل من القصيبات ، وتم تجميدها أفقيًا بمقدار 5 سم فوق بخار النيتروجين السائل لمدة 10 دقائق. ثم تم غمر القصيبات بسرعة في النيتروجين السائل. تم إجراء الذوبان عند 37 درجة مئوية لمدة 30 ثانية لتقييم الحركة والحيوية وسلامة غشاءالبلازما وسلامة قلنسوة الحيامن.
أظهرت النتائج التي تم الحصول عليها من هذه التجربة عدم وجود فروق معنوية في معاملات جودة الحيامن المحفوظة في مخفف تريس سترات الفركتوز بين طريقتي mincingوflushing لكن طريقة mincing أكثر عملية وسريعة.
التجربة الثانية: بناء على نتائج التجربة الأولى، تم جمع الحيامن من ذيلالبربخ الأيمن والأيسر لـ16 كلبًا باستخدام طريقة mincing. تم تقسيم معلق الحيامن المجمعة إلى ثلاثة أجزاء ثم تم تخفيفها باستخدام المخففات الثلاثة التالية ؛ مخفف تريس سترات الفركتوز ومخفف الانرا-96 (INRA 96)ومخفف اوبتكسيل OptiXcell)).

Issued also as CD

Text in English and abstract in Arabic & English.