000 07715namaa22004451i 4500
003 OSt
005 20250410112910.0
008 250309s2024ua |||a|||frm||| 000 0 eng d
040 _aEG-GICUC
_beng
_cEG-GICUC
_dEG-GICUC
_erda
041 0 _aeng
_beng
_bara
049 _aDeposit
082 0 4 _a572
092 _a572
_221
097 _aPh.D
099 _aCai01.10.20.Ph.D.2024.Ho.E
100 0 _aHossam Nasr Tawfik Khalil,
_epreparation.
245 1 0 _aEffect of nano melatonin and nano zinc on gene expression of in vitro developmental competence of buffalo oocyte /
_cby Hossam Nasr Tawfik Khalil ; Supervision Prof. Dr. Samy Ahmed Abdel-Aziz, Dr. Omaima M. Kandil, Dr. Ismail Mostafa Ahmad, Dr. Maha Mansour Mohamed.
246 1 5 _aتأثير نانو الملاتونين ونانو الزنك على التعبير الجيني لكفاءة نمو البويضات بالجاموس معملياً /
264 0 _c2024.
300 _a144 pages :
_billustrations ;
_c25 cm. +
_eCD.
336 _atext
_2rda content
337 _aUnmediated
_2rdamedia
338 _avolume
_2rdacarrier
502 _aThesis (Ph.D)-Cairo University, 2024.
504 _aBibliography: pages 113-132.
520 _aThis work was carried out for four successive years (2020, 2021, 2022 and 2023) to investigate the effect of melatonin (Mel), melatonin-loaded chitosan nanoparticles (CMN), zinc sulfate (Zn-SO4), and nano zinc oxide (NZn-O) on buffalo, 1) Oocytes in-vitro maturation rate, 2) transferable embryos rate, 3) Gene expression of in-vitro matured buffalo oocytes and 4) Gene expression of transferable buffalo embryos. Excellent and good oocytes were cultured in different in-vitro maturation (IVM) medium (TCM-199 medium supplemented with 10 -9 M melatonin or 10 -9 M melatonin-loaded chitosan nanoparticles or zinc sulfate 10-6 M or nano zinc oxide 10-6 M or TCM199 as control group) at 38.5 ºC, 5% CO2 for 22 hrs, then fertilized using frozen semen and in-vitro cultured on SOF media for 7 days. The morphologically normal in vitro matured oocytes were fertilized using frozen semen and cultured on SOF media to detect cleavage and transferable embryo rates to assess viability or matured oocytes or transferable embryos were stored in liquid nitrogen after evaluation for gene expression. The mRNA was extracted from buffalo in vitro matured oocytes or in vitro produced transferable embryos using Picopure kits, and cDNA was synthesized by QuantiTect Reverse Transcription kits. Quantitative analysis of relative levels of GDF9, BMP15, BCL2, BAX, and SOD1 genes in in-vitro matured buffalo oocytes and in-vitro produced buffalo transferable embryos by real-time PCR was performed. The results reported that melatonin-loaded chitosan nanoparticle (CMN), melatonin, and nano zinc oxide treatment have a significant effect on the maturation rate, and cleavage rate. CMN and NZn-O significantly increase the transferable embryo rate of buffalo when compared with control groups and Mel and Zn groups. Moreover, the melatonin-loaded chitosan nanoparticle (CMN), melatonin, and nano zinc oxide supplementation have significantly upregulated the GDF9, BMP15, SOD1, and BCL2 genes and downregulate the BAX gene during oocyte maturation and embryo development competence. In conclusion, Melatonin-loaded chitosan nanoparticles, melatonin and nano zinc oxide improve oocyte maturation rate and cleavage rate, CMN and Nzn-O significantly increase the transferable embryos rate with the emphasis on upregulation of GDF9, BMP15, SOD1, BCL2 gene expression and downregulation of BAX gene expression.
520 _aتم تنفيذ هذا العمل لمدة اربعة سنوات متتالية (2020 ، 2021 ، 2022 ،2023) وذلك لتحديد تاثير معاملات الميلاتونين والميلاتونين المحمل بالنونو كيتوزان والزنك والنانونو زنك على 1- نضوج بويضات الجاموس، 2- اجنة الجاموس المحضرة معمليا للزرع 3- التعبير الجيني للبويضات الناضجه معمليا 4- التعبير الجيني للاجنه المجهزة لعمليات النقل او الزرع بالجاموس. تم استزراع البويضات المختارة (ذات النوعية الممتازة والجيدة) في وسط TCM-199 عند 38.5 درجة مئوية ، و 5٪ من ثاني أكسيد الكربون لمدة 22 ساعة ثم تم تخصيبها باستخدام السائل المنوي المجمد وزرعها على وسط SOF . تم تجميد البويضات الناضجة والاجنة القابلة للنقل وتخزينها في النيتروجين المسال بعد تقييمها. تم تخصيبها باستخدام السائل المنوي المجمد وزرعها على وسط SOF. تم عد البويضات ذات الشكل الطبيعي واللاجنة القابلة للنقل.تم استخراج الحمض الريبي النووي من جميع المجموعات متبوعًا cDNA. والتحليل الكمي لجينات BMP15 و GDF9 و BAX و BCL2 و SOD1 سواء لبويضات الجاموس المجمدة او لاجنه الجاموس المحفوظة بالتجميد.باستخدام ال PCR . أظهرت النتئج ان استخدام الميلاتونين والالميلاتونين المحمل على النانو كيتوزان والنانو زنك له تاثير واضح على مستوى كفاءة البويضات إثباتها بشكل ملحوظ (P <0.05) في البويضات ذات الشكل الطبيعي وفي تطورها للاجنة القابلة للنقل. أيضًا ، أظهرت النتئج ان استخدام الميلاتونين والميلاتونين المحمل على النانو كيتوزان والنانو زنك له تاثير واضح على مستوى كفاءة البويضات إثباتها بشكل ملحوظ (P <0.05) على مستوى التعبير الجيني حيث ان النتائج اظهرت ارتفاعا ملحوظا ومعنوي للتعبير الجيني الخاص ب GDF9 و BCL2 و SOD1 و وهبوط ملحوظ ل BAX وذالك اثناء نضوج البويضات وتطور الاجنه القابله للنقل الخلاصة اظهرت النتائج تاثيرا ملحوظا على كفاءة التنموية لبويضات الجاموس الناضج في المختبر وأجنة الجاموس و وعلى التعبير الجيني لهذه البويضات والاجنه التى تم نضجها على وسائط تحتوي على معاملات الميلاتونين والميلاتونين المحمل بالنونو كيتوزان والنانونو زنك مما يوضح مدى اهميه دور هذه المواد على نضج وكفاءة البويضات والاجنه المنتجه معمليا.
530 _aIssues also as CD.
546 _aText in English and abstract in Arabic & English.
650 7 _aBiochemistry
_2qrmak
653 0 _aBuffalo
_ain vitro maturation
_atransferable embryo
_amelatonin nanoparticle
_anano zinc oxide
_azinc sulfate
_agene expression
700 0 _aSamy Ahmed Abdel-Aziz
_ethesis advisor.
700 0 _aOmaima M. Kandil
_ethesis advisor.
700 0 _aIsmail Mostafa Ahmad
_ethesis advisor.
700 0 _aMaha Mansour Mohamed
_ethesis advisor.
900 _b01-01-2024
_cSamy Ahmed Abdel-Aziz
_cOmaima M. Kandil
_cIsmail Mostafa Ahmad
_cMaha Mansour Mohamed
_UCairo University
_FFaculty of Veterinary Medicine
_DDepartment of Biochemistry and Molecular Biology
905 _aShimaa
_eEman Ghareb
942 _2ddc
_cTH
_e21
_n0
999 _c171111