Thesis (Ph.D)-Cairo University, 2025.

Bibliography: pages 80-90.

Two versatile yet straightforward analytical methods—colorimetric and
spectrofluorimetric—were developed for the quantification of non-chromophoric neomycin
using silver nanoparticles modified with fluorescein. Fluorescein, when excited at 485 nm,
exhibits fluorescence emission at 515 nm. However, upon adsorption onto the surface of silver
nanoparticles, its fluorescence is quenched. The addition of neomycin restores fluorescence at
515 nm by displacing fluorescein from the nanoparticle surface. This interaction also leads to a
decrease in the silver nanoparticles’ surface plasmon resonance band at 395 nm and induces a
visible color change in the solution from yellow to pale pink. The spectrofluorimetric and
colorimetric methods demonstrated linear calibration ranges of 5–45 ng/mL and 0.5–10 μg/mL,
respectively.

A high-performance liquid chromatographic (HPLC) method was developed and
validated for the simultaneous estimation of ceftazidime and tebipenem in rat samples. Sample
preparation involved protein precipitation using acetonitrile. Optimal chromatographic
separation was achieved using an INERTSIL ODS-3 C18 column with a mobile phase consisting
of 0.05 M phosphate buffer (pH 4.2, adjusted with 85% ortho-phosphoric acid) and acetonitrile
in a 70:30 (v/v) ratio. The flow rate was maintained at 1 mL/min, and the column temperature
was set to 25 °C. Retention times for ceftazidime, tebipenem, and the internal standard
doripenem were approximately 5.52, 7.31, and 9.90 minutes, respectively. Calibration curves
were linear over the concentration ranges of 1–40 μg/mL for ceftazidime and 0.5–30 μg/mL for
tebipenem.

A simple and sensitive spectrofluorimetric method was developed for the quantification
of nitazoxanide. Upon reduction with zinc powder in an acidic medium, nitazoxanide produces
a highly fluorescent product. To achieve maximum sensitivity, various experimental parameters
affecting the fluorescence response were systematically investigated and optimized. The
fluorescent product was excited at 299 nm, and emission was measured at 440 nm. The
fluorescence intensity showed a linear relationship with nitazoxanide concentration over the
range of 0.1–0.6 µg/mL. The proposed method was successfully applied to the analysis of
commercially available nitazoxanide dosage forms. Additionally, the method was effectively
used to determine nitazoxanide concentrations in human plasma.
The analytical methods validation has also been performed following the guidelines of
International Council on Harmonization (ICH) and the bioanalytical technique has been
validated according to the European Medicines Agency guidelines (EMA). The developed
methods for routine analysis were simple, sensitive, accurate, economical and highly robust. In
addition, greenness, whiteness, and blueness assessments of the developed methods were
conducted, and they were approved as environmentally benign methods.

تم تطوير طريقتين تحليليتين متعددتي الاستخدامات وسهلتي التنفيذ—التحليل اللوني والتحليل الطيفي الفلوريلتحديد كمية النيومايسين غير الكروموفوري باستخدام جزيئات الفضة النانوية المعدلة بالفلوورسين. الفلوريسيبن، عند تحفيزه عند 485 نانومتر، يظهر انبعاث الوميض عند 515 نانومتر. ومع ذلك، عند الامتصاص على سطح جزيئات الفضة النانوية، يتم إخماد فلوريسين. إضافة النيومايسين تستعيد الفلورية عند 515 نانومتر عن طريق إزاحة الفلورسين من سطح الجسيمات النانوية. تؤدي هذه التفاعلات أيضًا إلى انخفاض في نطاق الرنين السطحي لجسيمات الفضة النانوية عند 395 نانومتر وتسبب تغييرًا مرئيًا في لون المحلول من الأصفر إلى الوردي الفاتح. أظهرت الطرق الطيفية الفلورية واللونية نطاقات معايرة خطية تتراوح بين 5-45 نانوغرام/مل و0.5-10 ميكروغرام/مل على التوالي.
تم تطوير طريقة كروماتوغرافيا السائل عالية الأداءوالتحقق من صحتها لتقدير كل من سيفتازيديم وتيبينيم في عينات الفئران بشكل متزامن. شملت تحضير العينة ترسيب البروتين باستخدام الأسيتونيتريل. تم تحقيق الفصل الكروماتوغرافي الأمثل باستخدام عمود مع طور متنقل يتكون من 0.05 M من محلول فوسفات (اس هيروجيني 4.2، تم ضبطه باستخدام 85% حمض الفوسفوريك) والأسيتونيتريل بنسبة 70:30 (حجم/حجم). تم الحفاظ على معدل التدفق عند 1 مل/دقيقة، وتم ضبط درجة حرارة العمود على 25 درجة مئوية. كانت أوقات الاحتفاظ للسيبتازيديم، والتبيبيبيم، والمعيار الداخلي دوريبينيم حوالي 5.52، 7.31، و9.90 دقيقة على التوالي. كانت منحنيات المعايرة خطية ضمن نطاقات التركيز من 1-40 ميكروغرام/مل للسيبتازيديم ومن 0.5-30 ميكروغرام/مل للتبيبينيم.
تم تطوير طريقة بسيطة وحساسة للطيف الفلوري لتحديد كمية النيتازوكسانيد. عند الاختزال بمسحوق الزنك في وسط حمضي، ينتج النيتازوكسانيد منتجًا فلوريًا عالي الفلورية. لتحقيق أقصى حساسية، تم التحقيق بشكل منهجي في تحسين مختلف المعلمات التجريبية التي تؤثر على استجابة الفلورية. تم تحفيز المنتج الفلوري عند 299 نانومتر، وتم قياس الانبعاث عند 440 نانومتر. أظهر شدة الفلورية علاقة خطية مع تركيز النيتازوكسانيد في النطاق من 0.1 إلى 0.6 ميكروغرام/مل. تم تطبيق الطريقة المقترحة بنجاح على تحليل أشكال الجرعات المتاحة تجارياً من نيتازوكسانيد. بالإضافة إلى ذلك، تم استخدام الطريقة بفعالية لتحديد تركيزات النيتازوكسانيد في بلازما البشر.
تم أيضًا إجراء التحقق من صحة الطرق التحليلية وفقًا لإرشادات المجلس الدولي للتوحيد وتم التحقق من صحة التقنية الحيوية وفقًا لإرشادات وكالة الأدوية الأوروبية. كانت الطرق المطورة للتحليل الروتيني بسيطة، حساسة، دقيقة، اقتصادية وقوية للغاية. بالإضافة إلى ذلك، تم إجراء تقييمات للون الأخضر والأبيض والأزرق للطرق المطورة، وتمت الموافقة عليها كطرق صديقة للبيئة.

Issues also as CD.

Text in English and abstract in Arabic & English.